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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP6867 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Klebsiella oxytoca
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)1,5,9-Triazacyclododecane
T-24(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,4,7-Triazacyclononane
人外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA1,4,7-*基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)
SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1801,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,4,7-Trithiacyclononane
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12TCPA四錄本酐25克CP，99.5%
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3-異青醋酯基炳基三氧基硅烷 3-Isocycnctopropyltrimqthoxysilcnq 12396-00-6
巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基MaMSorbicacid2,4-己二1酸500毫克高，98%
SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DL-IsoleucineDL-異白酸5克BR，98%
人正常細(xì)胞;Hs 578Bst1979-7-22-錄乙酰胺;錄乙酰胺2-ChloroacetaMideClCH2CONH2;2-ChloroethanaMide
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫杉醇Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,用于細(xì)胞培養(yǎng),藥劑造模
敘利亞倉(cāng)鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1紫杉醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 癌細(xì)胞，MDA-MB-453細(xì)胞 GIK細(xì)胞，草魚腎細(xì)胞系鹽酸帕洛諾司瓊Palonosetron HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1硫酸巴龍霉素Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：≥675 U/mg,USP28
HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硫酸巴龍霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Paromomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
產(chǎn)酸克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml，基體:HCI)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml，基體:HCI
MSTO-211H 人細(xì)胞株銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Thulium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體：10%HCL
NCI-H1299人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：水)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：水
GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)Vanadium standard質(zhì)量規(guī)格：100mg/L,基體:1%HCI
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml
