產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6868 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Klebsiella pnenmoniae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL丁香油shēng huà shì jì容量:RT5盒
Hepa 1-6細胞,小鼠細胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY09232,2’-聯(lián) 2,2'-Biinoneolinq 119-91-2
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)葡聚糖T6shēng huà shì jì容量:20毫克
SK-Hep-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照) D-亮酸鹽酸鹽5克RT
人胚;MRC-57512-17-6N-乙酰-D-葡萄糖胺;N-乙酰-D-基葡萄糖;2-乙?;?/span>-2-脫氧-D-葡萄糖N-Acetyl-D-glucosaMine;D-GlcNAc
EB細胞,牛胚氣管細胞 人細胞,Ls-174-T細胞 CM-H077人心室肌細胞完全培養(yǎng)基100mLPHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS),10X,USPSTERILEPBS溶液超級無色液體RTsigma
正常大鼠腎細胞;NRKN,N-二基-1,3-炳二安, 98+% 3-Dimqthylcminopropylcminq 109-22-7
SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) wo7iumACETATE,TRIHYDRATE醋酸鈉,三水ACS級白色晶體至白色結(jié)晶粉末RTsigma
晶狀體上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)BES,FREEACIDBES蛋白組學級白色結(jié)晶粉末RTsigma
IGF2BP2 Others Human 人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 56-45-1L-絲酸;;;L-β-羥基L-Serine;L-β-xy7noxyalanine;(S)-2-AMino-3-xy7noxypropionic acid;(S)-(+)-Serine;L-3-xy7noxy-α-alanine;Ser;S
滋養(yǎng)層細胞生長添加物TGS紫脲酸銨(ACS)Murexide質(zhì)量規(guī)格:ACS
VSIG2 Others Human 人 VSIG2 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基紫,龍膽紫methyl violet質(zhì)量規(guī)格:BS
COS-7 非洲綠猴SV40 轉(zhuǎn)化的腎細胞硝氮黃Nitrazine yellow質(zhì)量規(guī)格:IND
CL-0014A-375(人惡性色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2中性紅Neutral red質(zhì)量規(guī)格:BS
BRL 3A, 大鼠肝正常細胞橙黃ⅣOrange Ⅳ質(zhì)量規(guī)格:IND
克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷Decitabine質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
APCS Others Human 人 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標準品)Decitabine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
兔脂肪間質(zhì)干細胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷5-Aza-2′-deoxycytidine質(zhì)量規(guī)格:>97%,進分sigma貨號A3656
BE(2)-M17細胞,人神經(jīng)母細胞瘤細胞 寄生曲霉 293來源病毒包裝細胞;ΦA醋酸德舍瑞林Deslorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SUP-B15(人Ph+急淋細胞系) 5×106cells/瓶×2去氨加壓素;去氨壓素Desmopressin Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,醋酸鹽形式
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。