產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6869 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Klebsiella spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
HPMEC-c 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3-去氮腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口,97%3-Deazaneplanocin A HCl salt
神經(jīng)元生長添加物NGS4-氧代維甲酰酚胺質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口3-Keto Fenretinide
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-表米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口4-Epi Minocycline
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL?;敲撗跄懰徕c質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTaurodeoxycholic acid salt
F81細(xì)胞,貓腎細(xì)胞 NCI-H838 [H838](人細(xì)胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21rU亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRrU Phosphoramidite
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100克BR,粘度200 mpe.s
NK-92細(xì)胞,人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N.N-二基-1.3-炳二安 3-Diqthylcminopropylcminq 104-78-9
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24ProcyanidinB2原矢車菊素B2500ulAR,99%
SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲基綠shēng huà shì jì容量:1公斤
平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9801 人脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紫花前胡苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Nodakenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf紫蓳靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Corynoline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Astragaline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmitic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CV-1細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL王不留行黃酮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Vaccarin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美(標(biāo)準(zhǔn)品)Dexamethasone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人卵巢;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0433RWPE-2(人正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SL-7細(xì)胞,胚肺細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。