產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6876 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Lawsonia spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
人主動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:RT500克
RM-1細胞,小鼠細胞 LoVo(細胞) 人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]鄰-β-D-... 2-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside 2816-24-2 100MG 通用試劑
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標簽)香精 Jcsminq flcvour
SW480(人細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 肝素shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫克
人尿道上皮細胞cDNAHUC cDNA崩潰酶(-20℃)NA
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級
GHR2 金黃地鼠肋骨來源細胞芐星青每速G Bqnzcthinq bqnzylpqnicillin 1238-09-6
CM-M030小鼠腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLD-GlutamicacidD-麩酸10克BR,99%
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞CALCIUMCHLORIDE,1MSTERILE錄化鈣無菌溶液,1M生物技術(shù)級500MLRT
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0911 人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mLMu-Gal 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-1620
A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株植物血凝素Phytohemagglutinin質(zhì)量規(guī)格:BR
人橫紋肌細胞;A-204 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL6-糠基氨基嘌呤,激動素Kinetin,6-Furfurylaminopurine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
主動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸EGTA, egtazic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級
ENPEP Others Human 人 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 無水1酸二氫鈉(分子生物學級) phosphate, monobasic, anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學級
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T月桂?;“彼徕c(分子生物學級) lauroyl sarcosine質(zhì)量規(guī)格:>95%,分子生物學級
勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus地奧司明Diosimin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,BR
EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 地膚子皂苷Ic(標準品)Momordin Ic質(zhì)量規(guī)格:僅供鑒別用
人內(nèi)皮細胞HLEC地榆皂苷I(標準品)Ziyuglycoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細胞裂解液 (陽性對照) 地榆皂苷II(標準品)Ziyuglycoside II質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL丁香酚(標準品)Eugenol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品