產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6863 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
急毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:急毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Israeli Acute Paralysis Virus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光25克
HME2細胞,人色素瘤細胞 干酪乳桿菌干酪亞種 人癌細胞;MCF7反式-4-氧基肉桂醋異忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7
USMC(大鼠平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2昆布多糖shēng huà shì jì容量:100克
IBRS-2(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 人細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]HE瓊脂500克
人胚;WI-38 [WI38]4472-41-7氘代二甲基價酰按N,N-DImetxYLfonmemi7e-D7
人胚腎細胞-F克隆;293F酸鉀shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
P3X63Ag8.653細胞,細胞 耐長春新堿細胞系,HCT-8/VCR細胞 CM-H028人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2,2’-流基-二醇 2,2'-Thiodiqthcnol 111-48-8
正常大鼠腎細胞;NRK三油酸甘油酯shēng huà shì jì容量:RT100克
REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 多聚賴酸shēng huà shì jì容量:RT10克
口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM1760-24-3N-[3-(2-基乙基基)丙基]氧基硅烷N-[3-(Trimetxoxysilyl)propyl]etxylenediamine
HUASMC-c 人臍動脈平滑肌細胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)L-Carnitine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
子宮內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)左旋肉堿1酸鹽(>99%,BR)L-Carnitine L-tartrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
IL3 Others Human 人 IL-3 / Ierleukin-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 化(>98%,BR)Lead (II) iodide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1硬脂酸Lead (II) stearate質(zhì)量規(guī)格:BR
3T3-Swiss albino細胞,胚胎成纖維細胞 人細胞,CRL細胞 CM-M048小鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸(>99%,BC)Lead (II) sulfate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC
急毒探針法熒光定量PCR試劑盒轉(zhuǎn)化細胞 人卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml
人脈絡(luò)叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg丁草胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Butachlor質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,95%
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=7%)Butachlor solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=7%
U-2 OS細胞,細胞 人二倍體細胞系,KMB-17細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3炔草隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Buturon質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。