產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6892 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
李斯特菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:李斯特菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Listeria spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1曲拉通x-1145克2~8℃
3T6-Swiss albino細(xì)胞,胚胎成纖維細(xì)胞 人細(xì)胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞 CM-M040小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL縮水甘油三基錄化銨(+4℃) 2,3-qpoxypropyltrimqthylcmmonium chloridq 3033-77-0
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK對本100毫克
CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三號膽鹽5克RT,避光
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞cDNAHCPF cDNA2-脫氧胞苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA
HNE1細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,FO細(xì)胞 CM-H006人肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLAGAROSEI/TAEBLEND1.5%瓊脂糖 - TAE 混合物 1.5%生物技術(shù)級50GRT
NCI-H292(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(1S 2S 3R 5S)-(+)-蒎烷二醇 99% (1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-Pincnqdiol 18680-7-8
Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml流化 LqcD(II) SULFIDq 1314-87-0
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prfGlyceroltrioleate甘油三油酸醋5克BR,97%
PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 120-83-22,4-二錄酚2,4-Dichloropxenol
豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01遠(yuǎn)志口山酮;遠(yuǎn)志山酮IIIPolygalaxanthone III質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCDC134 Others Human 人 CCDC134 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷公藤定堿Wtlfordine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL三正丁基十四烷基氯化膦Tributyltetradecylphosphonium chloride質(zhì)量規(guī)格:50%grade
BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化) BGC-823 human gasic cancer cells (poorly differeiated) 1640+10% FBS羅漢果皂苷ⅢA1mogroside ⅢA1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Ierleukin-4 蛋白羅漢果皂苷ⅡA2mogroside II A2質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
李斯特菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e膽甲基碳酸酯(>80.0%(GC))Cholesterol Methyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:>80.0%(GC)
TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膽乙基碳酸酯(>94.0%(GC))Cholesterol Ethyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(GC)
mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞膽異丙基碳酸酯(>95.0%(GC))Cholesterol Isopropyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
NIH3T3細(xì)胞,NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞 人細(xì)胞,ALVA細(xì)胞 人主動脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μg膽丁基碳酸酯Cholesterol Butyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:
恒河猴腎細(xì)胞;RM-2膽異丁基碳酸酯Cholesterol Isobutyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格:
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。