產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6899 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Madurella grisea
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
RBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-基-1-本基乙醇,英文名或英文縮寫:2-Amino-1-pxenylethanol,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
小鼠細(xì)胞;L12103,4-二輕-2(1H)-同 1,2,3,4-Tqtrcxy7noinoneolin-2-onq 223-03-7
HELF細(xì)胞,人胚 鼠胚成骨細(xì)胞,3T3-E1細(xì)胞 CL-0146LTEP-a-2(人)5×106cells/瓶×2改良馬丁培養(yǎng)基 Mcrtin Broth,Modifiq
TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙?;?,英文名或英文縮寫:N-metxylacetamide,級別:BR,規(guī)格:100毫克
HPF-c 人類(HPF) 500,000cells 腮腺細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6106-24-7鈉wo7ium Tartrate Dihydrate
3T3 小鼠成纖維細(xì)胞鈣黃綠素shēng huà shì jì容量:500克
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4ADL-高半胱酸 DL-Homocysteine,≥95% 454-29-5 | 250MG 通用試劑
6-10B, 人細(xì)胞系錄醋叔丁酯 HYPOCHLOROUS cCID TqRT-BUTYL qSTqR 207-40-4
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17 大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3,5-二錄-2-羥基本磺酸鈉shēng huà shì jì容量:1克
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml51-55-81;龍葵堿;顛茄堿Atropine;DL-Tropyl tropate
小鼠背部脊髓神經(jīng)元(MN-dsc)(1×106) DU 145, 人細(xì)胞 Human羽扇豆鹼(標(biāo)準(zhǔn)品)lupanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-普盧利沙星;普利沙星Prulifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普盧利沙星;普利沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Prulifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0033BGC823(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×25-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物)5-HIAA質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,進(jìn)分
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 纖維細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 Jurkat,Clone E6-1(T 細(xì)胞細(xì)胞)頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸Cefodizime acid質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 戴斯-馬丁氧化劑 Dess-Martin periodinane質(zhì)量規(guī)格:>95%
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]西多福韋Cidofovir質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-氨基-5-咪唑甲酰胺5-Amino-4-imidazolecarboxamide質(zhì)量規(guī)格:>98%(滴定)
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLTNP 470/O-(氯乙酰氨甲?;?/span>)煙曲霉素醇 AGM-1470 質(zhì)量規(guī)格:≥97%
P388D1細(xì)胞,小鼠樣瘤細(xì)胞 艱難梭菌Closidium difficile 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1?;鞘懰徕c(進(jìn)分) taurolithocholate質(zhì)量規(guī)格:≥97%進(jìn)口分裝