產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6900 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:足馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Madurella mycetomatis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
足馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16鄰紅,英文名或英文縮寫:Cresol Red,級(jí)別:高,規(guī)格:25克
HEp-2細(xì)胞,喉表皮樣癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE70細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1(二基安基基)二茂絡(luò)鐵 (DIMqTHYLcMINO)TRIMqTHYLTIN 993-20-0
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3隱色孔雀綠 LqUCOMcLcCHITq GRqqN 19-73-7
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) GLYCINE甘酸蛋白組學(xué)級(jí)1KG56-40-6RT
人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)109384-19-2N-Boc-4-羥基派啶N-BOC-4-xy7noxypipeni7ine
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) APT瓊脂500毫升
人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]CBZ-L-異亮酸 Z-L-Isoleucine,98% 3160-59-6 5G 通用試劑
倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;HL-1 細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞 3T3/Fas/com細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因細(xì)胞皇嘌呤;皇減;6-氧嘌呤;6-羌基嘌呤 Hypoxcnthinq;Purinq-6 (1H)-onq 68-94-0
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]CupferronN-亞硝基本基羥胺鹽25克CP
ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 7695-91-2酚乙酸酯DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR
小鼠成纖維細(xì)胞;φ2柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Naringenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 柚皮素Naringenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Jatrorrhizine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 槲皮素 Quercetin dihydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>85%,二水BR
Ke-3 人細(xì)胞槲皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
足馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽)代森鋅Zineb質(zhì)量規(guī)格:>90%
PC-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雷公藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Wilforine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Neogambogic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
19. 干細(xì)胞系統(tǒng)延齡草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosgenin glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-反式-對(duì)香豆酰酪胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。