產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6901 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Madurella spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
UBA1 Others Human 人 UBE1 / UBA1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 肌酸激酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT100支/包
CL-0177OS-RC-2(人細胞)5×106cells/瓶×22,3-二羌基本全 2,3-Dixy7noxybqnzcldqhydq 4677-78-9
Saos-2,人成細胞 高分化細胞,CNE-1細胞 RBL-2H3(細胞)shēng huà shì jì容量:1公斤
人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]shēng huà shì jì容量:25克
FOLR2 Others Human 人 FOLR2 / FBP 人細胞裂解液 (陽性對照) 55289-35-52-溴-6-硝基2-Bromo-6-nitnotolue
家豬皮膚細胞;SSC-S1SUCROSE蔗糖蛋白組學(xué)級白色精細結(jié)晶RTsigma
IL23R Others Human 人 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二羌基;1,3-二酚;間二酚 1,3-Dixy7noxyncphclqnq;Ncphthorqsorcinol;1,3-Nc- phthclqnqdiol 13-86-2
腎動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2-嗎啉磺醋內(nèi) MES-Na MqS wo7ium sclt 71119-3-8
CGM1細胞,人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞 615小鼠滑膜瘤株,ZM755細胞 人周細胞裂解物HBVCL乙酸-1-奈酯,英文名或英文縮寫:α-Napthyl acetate,級別:超,98%,規(guī)格:1克
NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2維生素 EVitamin E
MDA-MB-436人腺癌細胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS右美沙芬-d3Dextromethorphan-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)貝沙羅汀-d4Bexarotene d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠雪旺細胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細胞 Human二氫酮洛芬(非對映)Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1二氫酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非對映Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers質(zhì)量規(guī)格:美國進口
PNLIPRP1 Others Human 人 PNLIPRP1 / PLRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 來氟米特3-異構(gòu)體Leflunomide 3-Isomer質(zhì)量規(guī)格:美國進口
馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL大內(nèi)皮素-1(1-38),人Big Endothelin-1 (1-38), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse大內(nèi)皮素-1 (1-39),豬Big Endothelin -1 (1-39),porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照) 腦鈉素-32,大鼠BNP-32, rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]鈴蟾肽Bombesin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 緩激肽Bradykinin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。