產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6905 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mannheimia granulomatis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝山芋酸,英文名或英文縮寫:Behenic acid,級別:BR,95%,規(guī)格:0.5毫升
rCF, 大鼠成纖維細(xì)胞 A4細(xì)胞 HL-7702(肝細(xì)胞)(-)-BUTcCLcMOL xy7noCHLORIDq
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]洛伐他汀 Lovcstctin 72330-72-2
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 游離生物素測定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:50張/盒
人結(jié)細(xì)胞;T84N-芴甲氧羰?;?/span>-L-本酸NA
氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)H33342熒光染料25克
TALL-104細(xì)胞,急性T細(xì)胞細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株,G422細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞裂解物HLFL鄰苯二二(2-甲... Bis(methylglycol) phthalate,≥90% 117-82-8 25G 通用試劑
NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2拉米夫定溶液混合物A LcMivudinq Rqsolution Mixturq c 134678-17-4
Calu-1(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0054Calu-3(人)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317馬血清shēng huà shì jì容量:25克
家貓腎細(xì)胞;CATK151777-38-9八(基硅烷基)Q8Octakis(trimetxylsiloxy)silsesquioxane
HGFA Others Human 人 HGFA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC))Methyl oleate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.0%(GC)
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1異丁香酚(正+反)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析)Isoeugenol質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析
KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 正壬烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))Nonane質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)
ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞1-萘酚(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Naphthol質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinN-二乙基亞硝胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-Nitrosodiethylamine質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒人非色素睫狀上皮細(xì)胞 (HNPCEpiC)( 5×105 ) LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 Human大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Emodin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29大黃酸Rhein質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
PFKFB3 Others Human 人 PFK2 / PFKFB3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rhein質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R014大鼠氣管和上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
GBC-SD, 人細(xì)胞 猴腎細(xì)胞,HepII細(xì)胞 TE 354.T(人皮膚基底細(xì)胞癌)大薊苷Pectolinarin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品