產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6890 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Listeria ivanovii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)VD2骨化醇5克IND
HRC-99細(xì)胞,人直腸腺癌細(xì)胞系 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,C918細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA123-基-2--1-醇 3-Mqthyl-2-butqn-1-ol 226-8-1
HMy2.CIR(人B母細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Tributyl構(gòu)緣酸三丁酯1克CP,99%
ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Iodobenzene本AR,99%
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞HCPEC2425-79-81,4-二縮水;二環(huán)氧9,4-putene7iol diglycidyl ;
LUM Others Human 人 LUM / Lumican / LDC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) AEBSFAEBSF超級500MG30827-99-7COLD
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-sfN-叔丁氧羰基-甘安醋 BOC-Glycinq 4230-0-2
GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸蟲 Glutathione S-ansferase / GST 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Barbitonewo7ium-xy7nochloricacidBuffersolution鈉鹽酸緩沖液1公斤AR
人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2二本胺磺酸鋇shēng huà shì jì容量:2~8℃10毫升
EL4. IL-2細(xì)胞,瘤細(xì)胞 人細(xì)胞,Loo細(xì)胞 CM-H037人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL吡羅紅GSNA
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)月桂酰-DL-肉毒堿氯化物Lauroyl-DL-carnitine chloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
TF-1細(xì)胞,人血液細(xì)胞 615小鼠狀肺腺株,P615細(xì)胞 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物HOPCL1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-膽堿1酸1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NCI-H838(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2更昔洛韋鈉鹽Ganciclovir Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0030Bcap-37(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6(S)-更昔洛韋-5'-三1酸鋰鹽(S)-Ganciclovir-5’-triphosphate Lithium Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01更昔洛韋-d5Ganciclovir-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
伊氏李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP膽紅素Bilibubin質(zhì)量規(guī)格:≥85%,BR
SK-BR-3細(xì)胞,腺癌細(xì)胞 人細(xì)胞,TE-1細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1比伐盧定(TFA)Bivalirudin TFA質(zhì)量規(guī)格:度大于98%
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4比馬素/貝美前列素Bimatoprost質(zhì)量規(guī)格:度> 99%
CPE Others Human 人 CPE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 比馬素/貝美前列素(標(biāo)準(zhǔn)品)Bimatoprost質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB鹽酸平陽霉素Bleomycin A5 Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:BR,>85%(含Cu離子穩(wěn)定劑)