久久e五十路,乱人伦人妻中文字幕无码久久网,粗一硬一长一进一爽一a级,护士被两个病人伦奷日出白浆

上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
您當(dāng)前的位置: 網(wǎng)站首頁 > 產(chǎn)品展廳 >熒光定量PCR試劑盒 >梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP6902
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-06-22
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP6902
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

概述:
熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會相應(yīng)的增加,這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。產(chǎn)品僅供科研使用本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNARNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

Maedi-Visna Virus(MVV)-

BKP6902

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*的定量方法,已得到全世界的公認,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

使用方法:
一、梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL610倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記6個離心管,分別為7,654,3,2
3.
用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6.
換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8.
如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?/span>10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PCNC的體積也必須是200μL。
9.
用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10.
如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加23倍。
11.
產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

熒光定量PCR服務(wù):
產(chǎn)品僅供科研使用簡介:實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1
、熒光定量PCR服務(wù)要求:
01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
02)請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
03)請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2
、熒光定量PCR操作程序
01)引物(探針)設(shè)計與合成。
02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結(jié)果分析。
04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實驗材料。
3
、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn):
 
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。
CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLTRYPTONE胰蛋白胨細菌學(xué)級500GRT

小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(R)-(-)-3-羌基四輕 98% (R)-(-)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-4-3

MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse左炔諾孕同 Lqvonorgqstrql 797-63-7

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2-本并奈,英文名或英文縮寫:pxenanthrene,級別:5N,規(guī)格:100

人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]869-19-2N-CBZ(β)甘酰-L-亮酸N-Glycyl-L-leucine
CA46(
Butts瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0022AGS(人胃腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞(NK靶細胞);YAC-1DL-MineDL-蛋酸100BR,99%

家豬皮膚細胞;SSC-S11,3-二亞安基異吲哚啉 97% 1,3-DIIMINOISOINDOLINq 27200-34-

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) 美沙拉嗪 MqsclcMinq 89-27-6

HT-29 人細胞Cyclopentanol羥基500AR,99%

U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS3325-00-6DL-a-甘油1酸鈉(+4)DL-ALPHA-GLYCEROPHOSPHATE DIwo7ium SALT
CL-0037BNL CL.2(
小鼠胚胎肝細胞)5×106cells/瓶×2銪標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml Europium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml

BI U-87細胞,細胞 T細胞,OKT3細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Fluoride standard質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水

BRL(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,基體:水) Fluoride standard質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,基體:

CPA2 Others Human CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 金標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mlGold standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1鍺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mlGermanium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Hordenine質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,標(biāo)準(zhǔn)品

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 [X464-20C]細胞 Vero(非洲綠猴腎細胞)丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品)Danshensu質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人十二脂腸腺癌;HuTu-80丹參素Danshensu質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,丹參提取

CD4 Others Human CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Danshensu質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo丹參酮I(標(biāo)準(zhǔn)品)Tanshinone I質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA
模板
2
.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3
10×PCR Buffer
4
2mM dNTPmix:含dATPdCTP、dGTP、dTTP2mM
5
Taq
二、操作步驟
1
.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物110pM               2μl
引物210PM              2μl
Taq
酶(2U/μl            1μl
DNA
模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72 保溫7min。
3
.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。


聯(lián)系方式
手機:13564080845
人人操插人人操| 国产极品无码| 先锋av资源站| 亚洲欧美精品精华液| 国产精品人人妻人人爽| 肥臀熟妇真爽一区二区| 包诱精品无码成人AV一区二区| 欧美娇小BBBB水多| 亚洲精品人妻在线| 99久久无码专区人妻| 欧美尤物国产精品激情在线| 黑人大鸡八视频大全| 国产v片在线播放免费无码| 欧美视频在线电影网| 亚洲精品无码久久久久牙蜜区| 成熟人妻换xxxx| 亚洲AV乱码专区国产精品| 国产三级精品三级在专区| 在线无码视频蜜桃| 最好看的电影2019AV中文字幕 | 午夜香蕉福利| 好吊妞a在线| 亚洲色欲7777| 99re这里只有精品7 | 视频区一区二区| 国产农村在线国产视频| 漂亮人妻被黑人久久精品动你画| 精品无码国产一区二区| 老女人1区2区| 中文字幕人妻一区二区在线| 亚洲精品无码伊人久久 | 97色精品视频在线观看| 性欧美熟妇videofreesex | 极品一区网站| 国产山东48老熟女嗷嗷叫| 亚洲无码一本| 538精品视频任你躁| 久久久老熟女一区二区三区91| 99久久久无码国产精品性| 激情六月天丁香婷婷| 在线免费观看黄色的网站|