產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6907 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng):反芻獸曼氏桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng):Mannheimia ruminalis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
反芻獸曼氏桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
CL-0418QGY-7703(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N7-(2-氨基甲酰-2-羥乙基)鳥(niǎo)嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)2-氨基-6,8-二羥基嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride
人男性正常細(xì)胞;Hs68 人粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL全反式甲酯視黃酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口all-trans Retinoic Acid Methyl Ester
人真皮成纖維細(xì)胞-裂解物HDF-a L13-順式-甲酯視黃酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口13-cis Retinoic Acid Methyl Ester
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-FAM ;6-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格:0.956-Carboxyfluorescein
家貓腎細(xì)胞;CATK12-叔丁基-5-(4-叔丁芐基硫)代-4-錄-3(二氫)噠嗪酮,英文名或英文縮寫(xiě):Pyridaben,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:1公斤
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-基苯硼酸 3-Aminobenzeoronic acid,98% 30418-59-8 1G 通用試劑
JeKo-1 人套細(xì)胞瘤細(xì)胞L-環(huán)己基甘安醋 L-clphc-Cyclohqxylglycinq 1438-21-9
22RV1人細(xì)胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人葡聚糖T500500u保存:-20℃
其他細(xì)胞因子5256-79-1PSS-辛基本基取代物Octapxenylsilsesquioxane
SKOV-3/DDP細(xì)胞,順鉑耐藥株 人細(xì)胞,Ovary細(xì)胞 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHDMEC cDNA油紅O/溶劑紅27/5BOil red O/Solvent Red 27 質(zhì)量規(guī)格:BS
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6AG/溶劑紅1/油紅113Sudan red G/Solvent Red 1質(zhì)量規(guī)格:BS
TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蘇丹B/溶劑3Sudan Black B /Solvent Black 3質(zhì)量規(guī)格:BS(生物染色)
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1BSudan Red B/Solvent Red 25質(zhì)量規(guī)格:AR
CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7B/溶劑紅19/脂肪紅7BSudan Red 7B/Solvent Red 19質(zhì)量規(guī)格:BS
反芻獸曼氏桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒HGC-27細(xì)胞,人未分化細(xì)胞 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,BE(2)-M17細(xì)胞 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1大豆素,黃豆苷元Daidzein質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CT26.WT(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2D-別蘇氨酸D(-)-allo-Threonine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CA10 Others Human 人 CA10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸去氧皮質(zhì)酮 Deoxycorticosterone acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 [HCT15]醋酸去氧皮質(zhì)酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Deoxycorticosterone acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 四氫生物蝶呤;沙丙蝶呤;(6R)-BH4Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)質(zhì)量規(guī)格:>99%
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。