產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6923 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
小孢子菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:小孢子菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Microsporum spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
H22(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠顆粒細(xì)胞MGC卡維丁(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Cavidine
胎牛血清FBS5-羥色胺鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Serotonin hydrochloride
PLXDC1 Others Human 人 PLXDC1 / TEM3 / TEM7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 月見草油(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別Evening primrose oil
CHO 中國倉鼠卵巢細(xì)胞龍血素A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Loureirin A
CL-0038BRL(大鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2苯并三氮唑鈉鹽(BTA-S)質(zhì)量規(guī)格:≥40%澄清淡黃色液體BTA-S
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)MTES甲基三乙氧基硅烷20prepsAR,97%
THP1細(xì)胞,人單核細(xì)胞型瘤 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞,BT-474細(xì)胞 非必需氨基酸 100XNEAA10-酰基-3,7-二羌基吩嗪 10-cCqTYL-3,7-DIxy7noXYPHqNOXcZINq 119171-73-
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO基橙;金蓮橙D;隊(duì)二基安基偶氮本磺醋內(nèi) Mqthyl orcngq;Gold orcngq;Hqlicnthinq B;Tropcqolin D;wo7ium p-diMqthyl-cMinoczobqnzqnq sulfonctq;4-{[4-(DiMqthylcMino)phqnyl]czo} bqnzqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;p-DiMqthyl-cMinoczobqnzqnq wo7ium sulfonctq;C.I.13025 247-28-0
IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) litxiumxy7noxidemonohydrate單水氫氧化5克4N
猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-183438-24-65-溴-2-嘧啶5-Bromo-2-iodopyrimidine
CADM3 Others Human 人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吲達(dá)帕胺Indapamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6.0,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A吲達(dá)帕胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Indapamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 帕醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Iopamidol質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,USP
角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)帕醇Iopamidol質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP
Ec109細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,COC1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCPEC cDNA鹽酸洛哌丁胺Loperamide HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小孢子菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸布舍瑞林Buserelin Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人平滑肌細(xì)胞HCSMC司骨化醇Secalciferol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 25-羥甾醇25-Hydroxyvitamin D2質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小型豬腎細(xì)胞;MPK利拉魯肽Liraglutide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
H125細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠脂肪細(xì)胞,L13T3細(xì)胞 CM-R111大鼠雪旺氏細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLMK4827 (Niraparib)MK-4827 (Niraparib)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。