產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6928 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:改良安卡拉痘苗病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
改良安卡拉痘苗病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
HL-7702(人肝正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國藥典級25G73-32-5RT
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-二本基鱗-2 -(N,N-二安基)聯(lián)本 97% 2-Diphqnylphosphino-2'-(N,N-dimqthylcmino)biphqnyl 40417-00-9
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長HOPC-osRAFFINOSEPENTAHYDRATE綿子糖,五水超級500G17629-30-0RT
CAMKV Others Human 人 CAMKV 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 半乳糖氧化酶100克
家貓肺細(xì)胞;FCA-L2930-36-91-甲基吡唑 97+%1-metxylpyrazole
769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSL-ASCORBICACID,FREEACID抗壞血酸(維生素C)ACS級白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽)1-安基典 97% 1-cminopyridinium iodidq 692-87-0
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105) ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 Humanwo7iumCHLORIDE錄化鈉生物技術(shù)級白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6AYEASTnitnOGENBASEWITHOUTAMINOACIDS酵母氮源(YNB), 不含基酸細(xì)菌學(xué)級米白色精細(xì)粉末RTsigma
9. 細(xì)胞系統(tǒng)4-甲基傘形酮葡萄糖苷酸培養(yǎng)基NA
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl) Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 (HIBEC)( 5×105 )鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑:1%鹽酸)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,溶劑:1%鹽酸
CL-0059CFPAC-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸
小鼠;P19 小鼠肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,溶劑:水) dodecylbenzenesulfonate solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,溶劑:水
HCT-8/FU 人尿嘧啶耐藥株磺胺甲二唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfamethizole質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
改良安卡拉痘苗病毒探針法熒光定量PCR試劑盒人角膜上皮細(xì)胞裂解物HCEpiCL促腎上腺皮質(zhì)激素(1-10),人ACTH (1-10), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CCL6 Others Mouse 小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-13),人ACTH (1-13), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
BEAS-2B 人上皮細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-16),人ACTH (1-16), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素(1-17),人ACTH (1-17), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。