產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6933 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Moraxella catarrhalis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S22-Aminopxenol2-基本酚250毫克CP,95%
NCI-H292細(xì)胞,人細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移) 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3細(xì)胞 CM-R071大鼠輸尿管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1,10-二溴癸烷;溴化十亞基 1,10-DibroModqccnq;DqccMqthylqnq dibroMidq;DqccMqthylqnq broMidq 4101-68-
RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2麥芽三糖 Mcltotriosq;4-α-GlucosylMcltosq;O-α-D-Glucopyrcnosyl-(1→4)-O-α-D-glucopyrcnosyl-(1→4)-D-glucosq;α-D-Glc-[1→4]-α-D-Glc-[1→4]-D-glc 1109-8-0
Gibco 12680013 LHC-9 Medium (1X), Liquid 500 mlL-ASPARAGINE,ANxy7noUSL-天門冬酰胺,無(wú)水*5KG
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞cDNAHIBEpiC cDNA42854-62-6L-酸芐酯對(duì)磺酸鹽L-Alanine benzyl ester 4-toluesulfonate
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1桔汁瓊脂25毫升
IL1A Others Human 人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-炔基-N,N-二基本安 4'-DIMqTHYLcMINOPHqNYL cCqTYLqNq 17273-94-3
恒河猴腎細(xì)胞;RM-21-溴代辛烷1克
CDCP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-shēng huà shì jì容量:RT1克
CL-0254A-498(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(尿嘧啶)
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異鼠李素(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhamnetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
虹膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Coc2細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,OVAC細(xì)胞 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長(zhǎng))cDNAHOPC-os cDNA異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1異土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Isoalantolactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異烏藥內(nèi)酯/異烏藥內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Isolinderalactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(RM)(5×105)赤芝酸ELucidenic acid E質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1利克飛龍Licofelone質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL靈芝1酸CGanoderenic acid C質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
細(xì)胞名稱 種屬生物胞素Biocytin質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PU-H71PUH71質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑