產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP6945 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)熒光素酶(細菌),英文名或英文縮寫:Luciferase from Bacteria,級別:精制級,40u/mg,規(guī)格:5克
T/G細胞,人平滑肌細胞 KM小鼠網(wǎng)織細胞瘤株,LⅡ細胞 人真皮成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L三鈉鹽三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用試劑
NEC(人細胞) 5×106cells/瓶×2拂橡膠 III Fluoro gum III
Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級1000 UnitsCOLD
綿羊皮膚細胞;OAR-S1硅烷偶聯(lián)劑SILANE COUPLING AGENT
A-431(人表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2十二烷基本磺酸鈉-6,英文名或英文縮寫:wo7ium dodecylbenzenesulfonate,級別:FMP,規(guī)格:1克
RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-脫氧-D-葡萄糖-5-鱗醋酯內(nèi)鹽 ≥99.0% (TLC)(-20°C) (2,3-dixy7noxy-4-oxo-pqntoxy)phosphonic ccid 190079-18-6
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]紅色氧化;四氧化三;丹;紅丹;氧化 Lqcd(II,IV)oxidq;MiniuM 1314-41-6
AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人細胞裂解液 (陽性對照) AEBSFAEBSF蛋白組學(xué)級50MG30827-99-7COLD
小腸平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6284-40-8葡MegluMine (AS)
RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酰輔酶A三鋰鹽Acetyl coenzyme A trilithium salt質(zhì)量規(guī)格:95%,美國進口原裝
人胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL尿素酶,脲酶(巨豆)Urease質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進分
HT1080細胞,人成纖維細胞 熱帶念珠菌 tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3蛋白酶VIIIProtease type VIII質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進口7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌
CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白曲安奈德Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MDBK(牛腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 (陽性對照) 曲安奈德(標準品)Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
鳥分枝桿菌類結(jié)核亞型探針法熒光定量PCR試劑盒PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 草酸依地普侖/草酸艾司西酞普蘭(標準品)Escitalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP6.2
BEL-7402細胞,細胞 人口腔表皮樣癌細胞,KB細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲(標準品)Racecadotril質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005
CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 尼羅替尼Nilotinib質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。