產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6973 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma felis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
CFPAC-1細(xì)胞,人細(xì)胞 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,RD細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albinoβ-Alanine3-基酸10克BR,98%
Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2二甲基黃 Dimethyl yellow,98% 1960-11-7 10G 通用試劑
Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人細(xì)胞分離液) 500ml錄化金(+4℃)(陰涼);四錄金醋;錄金水合物 Gold(III) chloridq hydrctq;xy7nogqn tqtrcchlorocurctq(III) hydrctq;Tqtrcchlorocuric(III) ccid 13423-07-1
人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物HPA-v LPROTEINMWMARKER,LOWRANGE蛋白Marker生物技術(shù)級(jí)暗藍(lán)色透明液體FROZENsigma
CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 923-61-5二棕櫚酰-L-a-1脂酰1,2-DIPALMITOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOETHANOLAMINE
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1Dimetxylyellow甲基黃25克電泳級(jí),90%
人成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105)1,3-二錄本;間二錄本 1,3-Dichlorobqnzqnq 241-73-1
CL-0123IBRS-2(豬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2工;水銀 Mqrcury;Quick silvqr
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLZ-甘酰-L-脯酰-L-精酰對(duì)硝基鹽,英文名或英文縮寫:Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克
BEL/FU 人尿嘧啶耐藥株肝素鈉標(biāo)準(zhǔn)品(冷凍運(yùn)輸)NA
Tsu-Pr1細(xì)胞,非型 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,KLE細(xì)胞 微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA依匹斯汀Epinastine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-氯依匹斯汀鹽酸鹽7-Chloro Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK9-氧絡(luò)依匹斯汀鹽酸鹽9-Oxo Epinastine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6β-羥基依普利酮6β-Hydroxy Eplerenone質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒Hep3B2.1-7細(xì)胞,人細(xì)胞 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞,D341Med細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Pyrazinamide質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,BR
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基無誘導(dǎo)劑(即用型) 100ml鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Demeclocycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品
人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕羅西汀N-Methyl Paroxetine質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106)硫酸頭孢喹諾Cefquinome sulfate質(zhì)量規(guī)格:干品Cefquinome>80%,BR