產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP6982 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:豬滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma hyosynoviae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
豬滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
293T細(xì)胞,人胚腎T細(xì)胞 人細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞 人心肌細(xì)胞裂解物HCML戈米辛D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98.0% (LC&T),標(biāo)準(zhǔn)品Gomisin D
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-11-甲基質(zhì)量規(guī)格:>98%1-Methyl Xanthine
IFNA5 Others Human 人 IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-羧基-X-羅丹明質(zhì)量規(guī)格:>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2西侖吉肽質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑Cilengitide,EMD121974,NSC 707544
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 柴胡皂苷B2(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Saikosaponin B2
SUNE-1亞株13-9B細(xì)胞,人細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,BALB/3T3 clone A31細(xì)胞 CM-H063人腎皮層上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLPOPSO,FREEACIDPOPSO生物技術(shù)級(jí)白色粉末RTsigma
OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雙琥珀酰亞安忻二醋酯磺醋內(nèi)鹽 ≥95% (H-NMR)(-20°C) BS3 8436-77-9
Promocell C-27020 Osteoblast MineralizationMedium, 成骨細(xì)胞礦化培養(yǎng)基(即用型) 500ml5,5'-二硫雙-(2-硝... 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), ... 69-78-3 1G 染色劑
肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)氧合血紅蛋白,英文名或英文縮寫:Oxyhemoglobin,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:1克
PRKD2 Others Human 人 PRKD2 / PKD2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (亞油酸)
長尾綠猴腎細(xì)胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氯化鎂六水(分子生物學(xué))Magnesium chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
CL-0217SP2/0(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 小鼠細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素),GT1.1細(xì)胞 OK(負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞)神經(jīng)氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens質(zhì)量規(guī)格:≥10 units/ mg
人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]乙酸鎳四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
豬滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒人細(xì)胞;HOS苯扎氯銨(標(biāo)準(zhǔn)品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法檢查用和容量法含量測(cè)定用
人成纖維細(xì)胞(HMF)(5×105)苯扎氯銨(標(biāo)準(zhǔn)品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定用
CM-H112人脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甲硫酸新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)Neostigmine methyl sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL甘草酸二鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Dipotassium glycyrrhizinate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Rattus尼美舒利(標(biāo)準(zhǔn)品)Nimesulide質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。