產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7001 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
巴氏細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:巴氏細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Nematodirus battus
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
615小鼠狀肺腺株;P615鋁酞菁(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Phthalocyanine Chloroaluminum
SERPING1 Others Human 人 SERPING1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)
人永生化細(xì)胞;CNLMG-B5538LC酞菁(>93.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N)Phthalocyanine
PNLIPRP2 Others Human 人 Galactolipase / PNLIPRP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 顏料藍(lán)15,酞菁藍(lán)B質(zhì)量規(guī)格:Pigment Blue 15
129小鼠胚胎干細(xì)胞 The 129 mouse embryonic stem cells5-羥基羅格列酮硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口5-Hydroxy Rosiglitazone Sulfate
GPL1 豚鼠肺成纖維樣細(xì)胞神經(jīng)酸酶(梭菌)25克
CM-M006小鼠完全培養(yǎng)基100mL2.6-二基本酚 2,6-Dimqthylphqnol 276-6-1
細(xì)胞頭孢曲鈉5克RT
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0907 人表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL對本二5毫克2~8℃
肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)874-42-02,4-二錄2,4-Dichloro
LA795(小鼠) 5×106cells/瓶×2 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞)鹽酸四環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetracycline hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml/羧芐西林鈉Carbenicillin di質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
BPI Others Human 人 BPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Carbenicillin di質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL芬苯達(dá)唑;苯硫咪唑Fenbendazole質(zhì)量規(guī)格:>99%
CHO/dhFr-倉鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- Chinese hamster ovary cells, dihydrofolate reductase deficiency IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS芬苯達(dá)唑;苯硫咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenbendazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
巴氏細(xì)頸線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 百蕊草素I;山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷;阿福豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Kaempferol-3-O-glucorhamnoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝永生化細(xì)胞;THLE-3寶藿苷I,羊藿苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Baohuoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105)貝母素甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Peimine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-H048人胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL貝母素乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Peiminine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL貝母辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Peimisine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。