產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7009 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SW1990細胞,人細胞 人胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬質(zhì)量規(guī)格:美國進口4-Acetoxy Tamoxifen
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)
Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分)質(zhì)量規(guī)格:美國進口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)
人基質(zhì)細胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物)質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)
IL17RB Others Human 人 IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (1R,4R)-N-去甲基鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride
Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)DEAE葡聚糖凝膠A-50shēng huà shì jì容量:5KU
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸 Methyl linoleate,≥99% 112-63-0 1G 通用試劑
人成細胞;MG-63肝速酶I(-20°C) HqPcRINcSq 902-39-
豚鼠心肌細胞;GP-H1 EBV 轉化的絨猴白細胞,B95-8細胞 MEL細胞,小鼠紅細胞PONCEAUS麗春紅S (猩紅S)*深紅色結晶粉末RTsigma
人胚;MRC-5587-84-8二本胺化 98%DIpxenYLAMINE SULFATE
CM-H010人小氣道上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸普魯卡因(標準品)Procaine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
WM35, 人色素瘤細胞伏立諾他雜質(zhì)Vorinostat impurity質(zhì)量規(guī)格:>98%
人細胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠完全培養(yǎng)基 100mL當藥醇苷(標準品)Swertianolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml皂素(進分)saponin質(zhì)量規(guī)格:進分,≥10 %
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 苦豆堿Aloperine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR
新德里超級細菌探針法熒光定量PCR試劑盒LOVE1細胞,結細胞 人色素瘤細胞,B16細胞 EB病毒轉化的人B細胞;HH-29巴馬汀氯化物一水合物(分析標準品)Palmatine chloride hydrate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
HCC827(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2BSA[=N,O-雙(*基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)
ARSA Others Human 人 ARSA / Arylsulfatase A 人細胞裂解液 (陽性對照) BSTFA[=N,O-雙(*基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于氣相色譜)
人肝細胞;HL-7702[L-02]N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
MS4A1 Others Ferret 雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照) TMS-咪唑(=N-*基硅基咪唑)(>98.0%(T))TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。