產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7036 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:三叉奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Ostertagia trifurcata
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
三叉奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
A-375[A375]細(xì)胞,惡性色素瘤細(xì)胞 細(xì)胞,Jurk. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431](S)-萘普生異?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich(R)-?;疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)
EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-普拉克索二鹽酸化物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(S)-Pramipexole Dihydrochloride
Bowes Melanoma細(xì)胞,色素瘤細(xì)胞 人原髓細(xì)胞細(xì)胞,AL7P/HL-60R細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29DNAMarkerⅢ25克
A172(人腦細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2D(+)-密二糖一水 》99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) A.C.Eformide毛細(xì)管電泳級甲先胺測序級50ML1975-2-7Frozen
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO75cm2三角斜口細(xì)胞培養(yǎng)瓶shēng huà shì jì容量:25克
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Fibrinogen 250mg/1g/5g Sigma F8630
原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml鹽酸吉西他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)Gemcitabine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸吉米沙星Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1甲磺酸吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
A549[A-549]細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞,SMMC-7721細(xì)胞 T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL膽酸鈉 cholate質(zhì)量規(guī)格:>98%,?;蜓蚰懼?/span>,培養(yǎng)基用
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]醋酸胰素Glucagon Acetate質(zhì)量規(guī)格:purity>97%,BR
三叉奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人肺泡上皮細(xì)胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg達(dá)那唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Danazol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氨苯蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Triamterene質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人臍內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL拉呋替丁Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HSC-T6細(xì)胞,鼠肝星形細(xì)胞 SW620(細(xì)胞) 人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品)Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白托可索侖/維生素E聚乙二醇琥珀酸酯Tocofersolan,VE-TPGS質(zhì)量規(guī)格:VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherol
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。