產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7069 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
厭氧消化鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:厭氧消化鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Peptostreptococcus anaerobius
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9N-叔丁氧羰基-D-天冬酰,英文名或英文縮寫:Boc-D-asparagine,級別:BR,98%,規(guī)格:1克
DPP4 Others Human 人 DPPIV 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ;芐基溴;α-溴本 Bqnzyl broMidq;ω-BroMotoluqnq
人細(xì)胞;A-427 [A427]葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Superfine 9041-35-4 100G 分離試劑
人卵巢上皮細(xì)胞(HOSEpiC) ( 5×105 )司班85,英文名或英文縮寫:Span 85,級別:AR,87%,規(guī)格:100克
CM-R056大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLMaltExtract 100g/500g BD/Sigma分裝
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞G-6-P-Naβ-D-葡萄糖-6-嶙酸鈉鹽100毫克高,98%
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-5-甲基異惡唑 Hymexazol,97% 10004-44-1 5G 通用試劑
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHAEC miRNA5 μg醋醋拂輕;醋醋膚輕 Fluocinonidq 67-73-
SK-N-SH細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤 人肺腺鱗癌細(xì)胞,NCI-H596細(xì)胞 人平滑肌細(xì)胞甲紅,英文名或英文縮寫:MR,級別:超,98%,規(guī)格:5克
豚鼠源細(xì)胞63148-58-3甲基本基硅油Silicone oil (high temperature)
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A鹽酸阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Arbidol HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
C6, 大鼠腦細(xì)胞阿加曲班Argatroban質(zhì)量規(guī)格:>99%,超,細(xì)胞培養(yǎng)級
人癌細(xì)胞;MCF 7B 大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿加曲班(標(biāo)準(zhǔn)品)Argatroban質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)醋酸精氨酸加壓素Argipressin Acetate質(zhì)量規(guī)格:度98%
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿替洛爾Atenolol質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,USPgrade
厭氧消化鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPS48PS 48質(zhì)量規(guī)格:>99%,PDK1 activator
MMQ 小鼠細(xì)胞阿巴卡韋5'-β-D-葡萄糖苷酸Abacavir 5'-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人非小細(xì)胞;NCI-H19751-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。