產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7075 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
鴿痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:鴿痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱:Pigeon Pox Virus(PPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS電泳緩沖液超級(jí)無(wú)色無(wú)混濁液體RTsigma
HuH-7人細(xì)胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6
CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色劑
人腎近曲小管上皮細(xì)胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸,英文名或英文縮寫:UDPGA,級(jí)別:BR,規(guī)格:200u
LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (L-賴酸)
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5F酸性橙II,英文名或英文縮寫:Orange Ⅱ,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:25毫克
TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (R)-4-芐基-2-惡坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7
BGC-803 人細(xì)胞L-蘇糖醋鈣 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6
97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麥牙提取物細(xì)菌學(xué)級(jí)1KGCOLD
TGFB1 Protein Human 重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人細(xì)胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)維生素B3(標(biāo)準(zhǔn)品)Nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106) 6-10B, 人細(xì)胞系 Human醋酸環(huán)丙孕酮,醋酸環(huán)丙氯地孕酮Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21醋酸環(huán)丙孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyproterone acetate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲地孕酮Megestrol base質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
鴿痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB 大鼠尿道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin質(zhì)量規(guī)格:>85%,BR
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)β-淀粉樣蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) β-促激素,人β-MSH, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素,猴β-MSH, monkey質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Ac-垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。