產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7080 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說(shuō)明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:三日探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Plasmodium malariae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
三日探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
APOA1 Others Human 人 ApoAI 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-環(huán)戊基-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR3-Cyclopentane-L-alanine
人胰腺腺泡上皮癌;HPACSEA-0400質(zhì)量規(guī)格:>98%,鈉離子-鈣離子交換子(NCX)抑制劑SEA0400
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 卡格列凈半水;坎格列凈半水質(zhì)量規(guī)格:>98%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SGLT2) 抑制劑Canagliflozin hemihydrate
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞dT亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格:>98%dT Phosphoramidite
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)5--5-脫氧環(huán)1腺苷質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口5'-Iodo-5'-deoxy Adenosine
CSNK2A1 Others Mouse 小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-亮醇25克
肺大內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2-溴-2-基炳醋;2-溴異丁醋;α-溴異丁醋 2-BroMo-2-Mqthylpropionic ccid;α-BroMoisobutyric ccid
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 人細(xì)胞,NCI-H596[H596]細(xì)胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細(xì)胞)透明質(zhì)酸酶1克RT
人細(xì)胞;SMMC-7721亞鈰shēng huà shì jì容量:100克
IL7R Others Mouse 小鼠 IL7Ra / CD127 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 白凡士林Vaseline
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2緊張素IIIAngiotensin III,human 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蜂毒明肽; 蜂針液明肽Apamin 質(zhì)量規(guī)格:BR,>97%
敘利亞倉(cāng)鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1枸櫞酸氯米芬,克羅米芬Clomiphene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MAPKAPK5 Others Human 人 MAPKAPK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ML-176;SR-3335SR3335;ML176質(zhì)量規(guī)格:>98%
CL-0081F81(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Semaxanib(SU-5416 )SU5416 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR(Flk-1/KDR)抑制劑
三日探針法熒光定量PCR試劑盒TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)腺苷5'-O-硫一1酸二鋰鹽Adenosine 5'-O-thiomonophosphate dilithium salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 ) Saos-2,人成細(xì)胞 Humanα-酮戊二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Ketoglutaric acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人惡性多發(fā)性;ERA-2α-酮戊二酸2-Ketoglutaric acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 卡博替尼 ;XL184Cabozantinib(BMS907351)質(zhì)量規(guī)格:>99%,廣譜酪氨酸激酶抑制劑
CM-H094人滑膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLD-絲氨酸乙酯鹽酸鹽H-D-SER-OET HCL質(zhì)量規(guī)格:>98%