產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7094 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Porcine Circovirus(PCV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Raji人Butt's瘤細(xì)胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡聚糖T7shēng huà shì jì容量:50毫克
FGF12 Protein Canine 重組狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2
AML-193(人急性單核細(xì)胞單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人神經(jīng)細(xì)胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量:25克
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考馬斯亮蘭G-250超級(jí)藍(lán)色至紅色結(jié)晶粉末RTsigma
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 12027-06-4化銨;化铔AMMoniuM iodide
Promocell C-28021 Hematopoietic Progenitor CellExpansion Medium DXF, 造血祖細(xì)胞擴(kuò)展培養(yǎng)基DXF 500mlCDC厭氧菌瓊脂100克
大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC1-基硼醋 1-Ncphthylboronic ccid 139-41-3
SMAD5 Others Mouse 小鼠 Smad5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ)100毫升
Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Gadolinium(III)oxide三氧化二釓5克CP,97%
人腦微內(nèi)皮細(xì)胞 人細(xì)胞,NCI-H520[H520]細(xì)胞 SAC-IIB2(腹水瘤細(xì)胞)二乙基己1雌酚二酸鹽NA
人胚胎;WI-38三醋酸甘油酯(>98%,BR)Glycerol triacetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PIEC細(xì)胞,豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人細(xì)胞,T84細(xì)胞 CM-H061人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甘氨酸鈉(>98%,BR)Glycine salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
心肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格:BC
豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒CM-R006大鼠完全培養(yǎng)基100mL?;敲撗跄懰徕cTaurodeoxycholic acid salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
5637, 人細(xì)胞 蓖麻蠶卵細(xì)胞,NISE-Sacy-12細(xì)胞 TE 353.Sk(人正常皮膚細(xì)胞)rU亞1酰胺單體rU Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyteBz-rA亞1酰胺單體Bz-rA Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) i-bu-rG亞1酰胺單體i-bu-rG Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1PF299804(EGFR抑制劑)Dacomitinib質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。