產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7107 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱(chēng):變異變形桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱(chēng):Proteus mirabilis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
變異變形桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Acc-2細(xì)胞,涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,MGC-803細(xì)胞 兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol
tTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));P19-CAG-tTA-3C3(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (S)-(+)-6-甲基-1-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-6-Methyl-1-octanol
人食道平滑肌細(xì)胞RNAHESMC miRNA5 μg(S)-(+)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-2-Octanol
SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (R)-鹽酸氟西汀質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口(R)-Fluoxetine Hydrochloride
PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-2-叔丁氧羰基基-3-本基-1-,英文名或英文縮寫(xiě):Boc-L-pxenylalaninol,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1克
DH82(犬巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-241,2,4-丁三醇;1,2,4-三羌基丁烷 1,2,4-Butcnqtriol 3068-00-6
大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元RN-c言醋米托醌 Mitoxcntronq xy7nochloridq 70476-8-3
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,4-二乙磺酸,英文名或英文縮寫(xiě):PIPES,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:10克
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3GDX 501(聚二本多孔小球)NA
RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 順式-格列美脲cis-Glimepiride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
HBE, 正常人上皮細(xì)胞系反式-羧基格列美脲trans-Carboxy Glimepiride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞)灰黃霉素-13C,d3Griseofulvin-13C,d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi多聚己糖透明質(zhì)酸Hyaluronate Hexasaccharide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD8A Others Human 人 CD8A / MAL 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 透明質(zhì)酸四糖Hyaluronate Tetrasaccharide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
變異變形桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷Flurbiprofen Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLO-6-芐基鳥(niǎo)嘌呤,MGMT 的抑制劑6-O-Benzylguanine(O6BG)質(zhì)量規(guī)格:>98%,MGMT 的抑制劑
MC-3T3細(xì)胞,小鼠前成骨細(xì)胞 LoVo(人細(xì)胞) 兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF竹紅菌甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypocrellin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)氟米龍Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格:>98%
CNE-2Z(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1ml氟米龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品