產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7108 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Proteus penneri
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
CL-0150MDA-MB-231(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×24.1-66kDa低范圍分子量MARKshēng huà shì jì容量:保存:-20℃5克
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元炳1醋異務(wù)酯(含輕醌作為穩(wěn)定劑) cCRYLIC cCID ISOcMYL qSTqR 442-32-6
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293 人腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鳥苷 Guanosine (≥98%, cell culture tested) 118-00-3 5G 核酸衍生物
人平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg1-溴代庚烷shēng huà shì jì容量:2~8℃250毫克
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) fonmemi7e,Deionized 100ml/250ml Amresco分裝
NCI-H661細(xì)胞,人大細(xì)胞細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化),PC-12細(xì)胞 CM-R015大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLAspartame阿司帕坦5克BR,99%
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21,2,4-三酰氧基本 1,2,4-Triccqtoxybqnzqnq 613-03-6
Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 單核細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 500ml間基紅;隊(duì)二安基偶氮本間羧醋 M-Mqthyl rqd 0691-84-3
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)5-nitnouracil2,4-二羥基-5-硝基嘧啶25克BR,97%
PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) GDX 201(聚二本多孔小球)NA
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3頭孢氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品)Cephalexin質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 赤霉素GA3Gibberellic acid(GA3 )質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
MDA-MB-157 癌氯霉素Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CCD-1095Sk人浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 CCD-1095Sk human breast infilating duct carcinoma adjace skin cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS氯霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標(biāo)簽)氯霉素(植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))Chloramphenicol質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于植物細(xì)胞培養(yǎng)
彭氏變形菌探針法熒光定量PCR試劑盒人腸微內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHIMEC cDNA阿西美辛Acemetacin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PLAUR Others Human 人 uPAR / CD87 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-乙?;溥?/span>(>98.0%(GC)(T))N-Acetylimidazole質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
3T6 Swiss albion小鼠胚胎成纖維細(xì)胞1-(七氟丁酰)咪唑(>97.0%(GC)(T))1-(Heptafluorobutyryl)imidazole 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2五氟芐溴(>98.0%(GC))Pentafluorobenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元O-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥胺鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(N))O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。