產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7114 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Providencia alcalifaciens
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE苯駢三氮唑(BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)1H-Benzotriazole質(zhì)量規(guī)格:AR,分析
NCI-H2087細(xì)胞,人非小細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸倍他司汀Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
RL95-2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸倍他司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Gibco 10725018 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid with L-Glutamine, without Calcium Chloride 500 ml甲磺酸倍他司汀Betahistine Dimesilate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞RNAHSkMSC miRNA5 μg(豬)INSULIN質(zhì)量規(guī)格:BR,來源豬胰臟
TSCCA細(xì)胞,人舌鱗癌細(xì)胞系 乙型副傷寒沙門氏菌 化大家鼠;NRmDENHARDTS50X*DRYICE*DENHARDT'S溶液,50X生物技術(shù)級(jí)50MLFrozen
CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標(biāo)簽)L-扁桃醋 (S)-(+)-Mcndqlic ccid 17199-9-0
MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 溶菌酶 LysozyMq froM chickqn qgg whitq BioChqMikc 1620-88-3
大鼠腦細(xì)胞;C6DIPSOFREEACIDDIPSO超級(jí)25G68399-80-4RT
MAPK1 Others Mouse 小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N,N-(3-二基丙胺)-N-乙基磺酰二HCLNA
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6?;萧斔咎?/span>-b-D-葡萄糖苷酸Montelukast acyl-b-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 孟魯司特Montelukast Ether質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
C26瘤 孟魯司特亞砜(非對(duì)映)Montelukast Sulfoxide(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
THLE-3人肝永生化細(xì)胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號(hào)CC3170)二氫孟魯司特鈉鹽Dihydro Montelukast Salt質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 標(biāo)簽)25-羥基孟魯司特25-Hydroxy Montelukast質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
產(chǎn)堿普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNAHEK NAO-叔丁基-L-蘇氨酸O-tert-Butyl-L-threonine質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-乙酰-D-色氨酸N-Acetyl-D-tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:0.98
KYSE30 人細(xì)胞D-酪氨酸甲酯鹽酸鹽H-D-Tyr-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格:0.99
CL-0320BC3H1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×22'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷2'-O-Methyladenosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元D-纈氨酸D-Valine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。