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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP7135 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ranavirus
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
L-6TG細(xì)胞，肌母細(xì)胞 人細(xì)胞,JCA-1細(xì)胞 人胚;MRC-5間硝基本胺100u
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4啊利新藍(lán)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1
ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3
人腎上皮細(xì)胞總RNAHREpiC NA，英文名或英文縮寫：potewwium xy7noxide，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：100克
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105)N-AcetylneuneminicAcid 25mg/100mg原裝 INALCO1758-0100
大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3無水三錄化，英文名或英文縮寫：Chromium(III) chloride anxy7nous，級(jí)別：標(biāo)準(zhǔn)品，99%，規(guī)格：5克
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9
LA795瘤 肺腺癌IMIDAZOLE咪唑蛋白組學(xué)級(jí)白色至淺黃色固體RTsigma
SK-OV-3人細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS4,4′-亞甲基二安替比林，英文名或英文縮寫：DAM，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：500克
FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)Ampholine PH4-6/5-7/6-9/3-9.5 國產(chǎn)
LLC-MK2細(xì)胞，恒河猴腎細(xì)胞 人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,RKO-E6細(xì)胞 CM-H117人腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）Potassium Sorbate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK甲磺酸倍他司?。?biāo)準(zhǔn)品）Betahistine mesylate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 葡醛內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Glucurolactone質(zhì)量規(guī)格：檢查
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM反鉑transplatin 質(zhì)量規(guī)格：>95%
FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 草酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxalic acid質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
蛙病毒探針法熒光定量PCR試劑盒SK-N-SH細(xì)胞，人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg氫氧化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
SF767(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-甲酰伐倫克林N-Formyl Varenicline質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡萄糖苷伐倫克林Varenicline N-Glucoside質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人細(xì)胞;CNE-2Z伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 去乙?；L(zhǎng)春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
