產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7171 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:雞白痢沙門氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱:Salmonella pullorum
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
雞白痢沙門氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1尼可地爾-d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Nicorandil-d4
Ca Ski, 人細(xì)胞尼可地爾N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Nicorandil N-Oxide
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251 大鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羥基尼可地爾質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口6-Hydroxy Nicorandil
人組織細(xì)胞瘤細(xì)胞;U937 [U-937]25-脫乙?;F劫|(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口25-Desacetyl Rifampicin
WFDC2 Others Canine 狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-腺苷質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口L-Adenosine
人角質(zhì)細(xì)胞HHFKAmberlite® IRC-748螯合型離子交換樹(shù)脂質(zhì)量規(guī)格:Amberlite® IRC-748
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 人,A549細(xì)胞 QG-56(肺扁平上皮癌細(xì)胞)Amberlyst15離子交換樹(shù)脂(濕)質(zhì)量規(guī)格:濕Amberlyst 15 ion-exchange resin
人惡性多發(fā)性;ERA-2丁胺卡那霉素?zé)o水質(zhì)量規(guī)格:效價(jià):>900 u/mgAmikacin
GFRA1 Others Human 人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氨茶堿(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAminophyllin hydrate
CM-H077人心室肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL檸檬酸鉍銨質(zhì)量規(guī)格:BRAmmonium bismuth , hydrate
Hat-78細(xì)胞,人T細(xì)胞瘤 小鼠細(xì)胞,Ranca細(xì)胞 人食道平滑肌細(xì)胞cDNAHESMC cDNAwo7iumBORATEBUFFER硼酸鈉緩沖液超級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
NEC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2酚AS-BI1酸二鈉 Naphthol AS-BI phosphate di salt... 530-79-0 50MG 通用試劑
COLO 320(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]慶大每速瓊脂 GqntcMycin cgcr;
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]GinsenosideRb3人參皂甙Rb325克BR
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 112-15-2二乙二醇醋酸酯2-(2-Ethoxyethoxy)etxyl acetate
雞白痢沙門氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38腺苷 3'-1酸 5'-1酰硫酸鋰鹽水合物Adenosine 3'-phosphate 5'-phosphosulfate lithium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
XCL1 Others Human 人 XCL1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) rac (cis/trans)多奈哌齊N-氧化物rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CM-R054大鼠子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL6-O-去甲多奈哌齊6-O-Desmethyl Donepezil質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
BPH-1, 人細(xì)胞 B細(xì)胞,XJH細(xì)胞 PLC/PRF/5(人細(xì)胞)脫氫多奈哌齊(多奈哌齊雜質(zhì))Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11多佐胺中間體Dorzolamide intermediate質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口