產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7190 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Serpulina spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3 膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL3'-對羥基紫杉醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口3'-p-Hydroxy Paclitaxel
SK-MEL-1, 人皮膚色素瘤細(xì)胞 Human紫杉醇-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Paclitaxel-d5
BCHE Others Human 人 BCHE / CHE1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-差向紫杉酚質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口7-epi-Taxol
人小氣道上皮細(xì)胞RNAHSAEpiC miRNA5 μg紫杉醇C質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Paclitaxel C
SEMA5A Others Human 人 SEMA5A / Semaphorin-5A / SEMAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-hydroxy-7-epi-paclitaxel
人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞總RNAHSkMSC NAL-色氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Tryptophan
CHRF細(xì)胞,人巨核細(xì)胞 人細(xì)胞系(未分化),Calu-6細(xì)胞 5637, 人細(xì)胞L-色氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-Tryptophan
家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1L-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Serine
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-賴氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRH-Lys-OH.HCl
CL-0353hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-鳥氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Ornithine monohydrochloride
腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-葡萄糖醛酸-r-內(nèi)酯,英文名或英文縮寫:D-Glucurone,級別:BR,98%,規(guī)格:1克
人海馬神經(jīng)元 人細(xì)胞,NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(瘤細(xì)胞)(S)-(+)-同洛芬 (S)-(+)-Kqtoprofqn 161-81-2
人色素瘤細(xì)胞;A875L-溶血卵鱗脂(冷藏運輸) Lysophosphctidylcholinq 9008-30-4
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CAPSOFREEACIDCAPSO超級25G73463-39-5RT
大鼠腦細(xì)胞;C64975-73-9N,N’-二環(huán)己基-4-嗎啉脒N,N'-Dicyclohexyl-4-morpholinecarboxamidine
小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2'-脫氧鳥苷-3'-單1酸二鈉2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生HEK-nN-乙酰-DL-甲硫氨酸N-Acetyl-DL-mine質(zhì)量規(guī)格:0.99
RK2 Others Rat 大鼠 kB / RK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格:0.95
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸m-Fluoro-DL-tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:0.99
BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)Calpain Inhibitor I(ALLN) 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。