產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7234 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Streptococcus pyogenes
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
HPAEC細胞,人肺動脈內(nèi)皮細胞 猴腎細胞系,BSC-1細胞 CL-0082F9(小鼠)5×106cells/瓶×2木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品Luteolin 7-O-glucuronide
SW626(人細胞) 5×106cells/瓶×2STA-9090;STA9090質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑Ganetespib
HAoEC-c 人主動脈內(nèi)皮細胞(HAoEC) 500,000cells 腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)赤芝酸D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%Lucidenic acid D
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)DAPT (GSI-IX)質(zhì)量規(guī)格:>98%,γ-secretase抑制劑DAPT (GSI-IX)
MUC1 Others Human 人 Mucin-1 / MUC-1 人細胞裂解液 (陽性對照) XAV-939;NVP-XAV 939質(zhì)量規(guī)格:>98%XAV939
間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基MADM霜霉威(分析標準品,99%)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%Propamocarb
NCI-H2170[H2170]細胞,人肺 人胚腎二倍體細胞,CCC-HEK-1細胞 人腦干星形膠質(zhì)細胞HA-bs喹(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Cloquintocet-mexyl
小鼠髖動脈內(nèi)皮細胞;PIEC降鈣素;醋酸鮭魚降鈣素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRSalcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) 塞卡替尼質(zhì)量規(guī)格:≥98.50%;Src抑制劑Saracatinib(AZD0530)
CM-M023小鼠管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL塞克硝唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRSecnidazole
大鼠癌細胞;MADB106T4RNALigaseT4 RNA連接酶25克BR
CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄代正炳烷 1-Chloropropcnq 240-24-2
CL-0021ACHN(人細胞)5×106cells/瓶×2KORSER氏枸櫞酸鹽肉湯shēng huà shì jì容量:RT5米
HEC-1-B細胞,人子宮膜腺癌細胞 人脈絡(luò)叢上皮細胞,HCPEpiC細胞 大鼠雪旺細胞;RSC96Silicone本基甲基硅油III25克ACS,99%
BT-474(人導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×24-錄本;對錄本4-Chlorobenzoic acid;Chlorodracylic acid
化膿性鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒T84細胞,人細胞 人色素瘤細胞,NW38細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0919L-天門冬氨酸1-甲酯L-Aspartic acid 1-methyl ester質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:0.98
ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 人細胞裂解液 (陽性對照) S-甲基-L-半胱氨酸S-Methyl-L-cysteine質(zhì)量規(guī)格:98%,進口分包
人Burkkit瘤細胞;DaudiS-三苯甲基-L-半胱氨酸S-Trityl-L-cysteine質(zhì)量規(guī)格:>98%
CTNNB1 Others Mouse 小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸1-甲酯L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格:0.97
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。