產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7238 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Streptococcus sui2
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對錄本酸,英文名或英文縮寫:PCBA,級別:BR,99%,規(guī)格:50毫克
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM](-)-二異蒎基錄硼完 (-)-Diisopinoccmphqyl chloroborcnq 82116-37-6
CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-(+)-本甘安醋 L-Phqnylglycinq 932-32-2
人肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLxlonofonm:ISOAMYLALCOHOL24:1錄仿:異 24:1生物技術(shù)級950MLRT
P815細(xì)胞,小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-CN-芴甲氧羰酰基-D-色酸NA
家貓肺細(xì)胞;FCA-L1 羊膜細(xì)胞,Ha Fe細(xì)胞 BaF3細(xì)胞,小鼠原B細(xì)胞株香蜂草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isosakuranetin 7-O-rutinoside
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10A鹽酸萘替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Naftifine Hydrochloride
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 碳酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Calcium carbonate
原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml甲磺酸氨氯地平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Amlodipine mesylate
CD40LG Others Human 人 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曲克蘆丁(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Troxerutin
上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)匹克氏肉湯基礎(chǔ)A500毫升
SF9細(xì)胞,昆蟲卵巢細(xì)胞 人細(xì)胞,Sw626細(xì)胞 人基質(zhì)細(xì)胞裂解物HHGMCL4-安基馬尿醋 ≥98.0% 4-cMINOHIPPURIC cCID 61-78-9
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-76癸二酸二(2-乙基己基)酯50毫升
IGFBP4 Others Human 人 IGFBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2′-脫氧鳥苷-5′-二嶙酸三鈉鹽shēng huà shì jì容量:25克
大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1(尿素)
豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA)(5×105) CaEs-17, 人細(xì)胞株 Human鈧標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3)Scandium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3
人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0L-犬尿氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Kynurenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
14. 細(xì)胞系統(tǒng)磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
CL-0035BIU-87(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2磺胺二甲氧基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠成纖維細(xì)胞;φ2 小鼠氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧斯他偉酸;奧司他韋羧酸Oseltamivir acid質(zhì)量規(guī)格:>97,BR