產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7314 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trichothecium spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 精酸肉湯500克
HUVEC, 人臍內(nèi)皮細胞腺嘌呤流醋鹽;流醋腺速;6-安基嘌呤流醋鹽 cdqninq sulfctq 31-30-
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 MSU-1細胞 Ha Fe(羊膜細胞)玉米素 Zeatin (≥98%, cell culture tested) 13114-27-7 5MG 核酸衍生物
急性T細胞細胞;TALL-104wo7iumPHOSPHATE,MONOBASIC,ANxy7noUS嶙酸二氫鈉,無水試劑級白色顆粒粉末RTsigma
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) Ficoll70 10g/100g原裝 Pharmacia17031010
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) 十八烷醇,1-十八醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品1-Octadecanol
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12十八烷醇,1-十八醇質(zhì)量規(guī)格:>98%1-Octadecanol
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人細胞裂解液 (陽性對照) Ruxolitinib (INCB018424)質(zhì)量規(guī)格:>99%Ruxolitinib (INCB018424)
人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLMK-1775,MK1775 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Wee1激酶抑制劑MK-1775
M1細胞,小鼠細胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside
小鼠原B細胞株;BaF3鏈脲佐菌素100克
TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-氧基 6-Mqthoxyinoneolinq;Mqthyl-6-inoneolyl qtqr 263-87-6
tTA基因修飾的小鼠細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3AGAROSEI/TBEBLEND1.5%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.5%生物技術(shù)級100GRT
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 乳酸過氧化物酶shēng huà shì jì容量:1克*5
BT474 人導(dǎo)管癌細胞Polypeptone 250g/1kg 國產(chǎn)
單端孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細胞裂解液 (陽性對照) 緩激肽Bradykinin質(zhì)量規(guī)格:>98%
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1D 13223 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
973細胞,人細胞 小鼠成骨細胞系,MC3T3-E1細胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2伊潘立酮-d3Iloperidone-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
THP-1(人髓系單核細胞) 5×106cells/瓶×2亞胺培南一水合物Imipenem Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自成年捐獻者 500,000cells 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5-羥基吲達帕胺5-Hydroxy Indapamide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。