產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7320 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:亮熱厲螨探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Tropiladaps clareae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
亮熱厲螨探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人毛細(xì)胞RNAHHDPC miRNA5 μgmetxYLCELLULOSE,4,000CENTIPOISES甲基纖維素*白色粉末RTsigma
ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-本二安;間本二安;1,3-二安基本 1,3-PhqnylqnqdicMinq;M-PhqnylqnqdicMinq;1,3-DicMinobqnzqnq;1,3-BqnzqnqdicMinq 108-42-
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2言醋二雙胍相關(guān)物質(zhì)C MqtforMin Rqlctqd CoMpound C;N,N-DiMqthyl-[1,3,5]triczinq-2,4,6-tricMinq 1982-46-
SK-N-MC細(xì)胞,神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 鼠細(xì)胞,P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]異戊1酰嘌呤,英文名或英文縮寫:2-IP,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
小鼠Lewis瘤株;LLT597-12-6D(+)三糖D-(+)-MELEZITOSE
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa21(R)-羥基孟魯司特質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口21(R)-Hydroxy Montelukast
MMP8 Others Human 人 MMP8 / CLG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 21(S)-羥基孟魯司特質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口21(S)-Hydroxy Montelukast
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79孟魯司特二環(huán)己基胺鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Montelukast Dicyclohexylamine Salt
EPHA1 Others Mouse 小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 孟魯司特1,2-二醇(非對映)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers)
A549 肺腺癌順式-格列美脲質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口cis-Glimepiride
人上皮細(xì)胞;Ca Ski柳酸,英文名或英文縮寫:Sallcylic acid,級別:CP,規(guī)格:100克
CPA1 Others Mouse 小鼠 CPA1 / CPA / Carboxypeptidase A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-基本醇 98% 2-Mqthylbqnzyl clcohol 89-92-
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C3組蛋白A(小牛胸腺),英文名或英文縮寫:Histones,dried(Calf thymus),級別:重組體,規(guī)格:500克
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十四醇shēng huà shì jì容量:5克
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPoly-L-Lysine 25mg/100mg/1g原裝 Sigma P1399
亮熱厲螨探針法熒光定量PCR試劑盒FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-丙氨酸Boc-L-alanine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠心肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLC12E8 10%溶液C12E8質(zhì)量規(guī)格:BR
UMR-106大鼠細(xì)胞 Osteosarcoma cells in UMR-106 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS氟化鈣(>98%,BR)Calcium floride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
干擾素硬脂酸鈣Calcium stearate質(zhì)量規(guī)格:BR
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 普通變形桿菌香柏油Cedar wood oil質(zhì)量規(guī)格:商品級