產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7325 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trypanosoma cruzi
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5Y1,4-二羥基醌shēng huà shì jì容量:RT25克
21. 臍帶細胞系統(tǒng)四正丁基化銨 Tetrabutylammonium chloride.≥97.0 1112-67-0 5G 通用試劑
CM-H104真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mLα-異十三烷基-ω-羌基-聚(氧-1,2-亞基) GqNcPOL(R) X-080 9043-30-2
小鼠胚胎成纖維細胞;PA317 小鼠小腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-Hexadecane正十六烷*無色液體RTsigma
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Rattus67-43-6二異胺DiisopropylaMine;N-(1-metxyletxyl)-2-propanaMine; DIPA;
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2‘-脫氧胞苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxycytidine;2'-dC
CL-0167NCI-H292(人細胞)5×106cells/瓶×22‘-脫氧胞苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品2'-Deoxycytidine;2'-dC
CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2’-脫氧腺苷質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR2'-Deoxyadenosine monohydrate
小鼠腸內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL魚精DNA質(zhì)量規(guī)格:進分,Sigma74782,蛋白小于1%DNA, Fishsperm
marc-145猴胚胎腎上皮細胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCPPO
人平滑肌細胞(HPSMC)(5×105) 細胞名稱 種屬乙醇脫氫酶100克
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E58-羌基虧哪啶 8-xy7noxyinonecldinq 86-81-3
人神經(jīng)細胞(HN) (10×106 )RNAMARKER-16S,23SRNA Marker2.5MGFrozen
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)四本硼鈉shēng huà shì jì容量:25克
人上皮細胞;Ca Ski 大鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基 100mL(對硝本基-α-D-
克氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠細胞;L1210Nα-BOC-D-精氨酸鹽酸鹽一水合物Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate質(zhì)量規(guī)格:BR
HELF細胞,人胚 鼠胚成骨細胞,3T3-E1細胞 CL-0146LTEP-a-2(人)5×106cells/瓶×2Boc-Arg(Mts)-OH·CHABoc-Arg(Mts)-OH·CHA質(zhì)量規(guī)格:BR
TM3(小鼠間質(zhì)細胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-纈氨酸Boc-Val-OH質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HPF-c 人類(HPF) 500,000cells 腮腺細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)BOC-L-天冬酰胺Boc-Asn-OH質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR
腦膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Boc-L-谷氨酰胺Boc-Gln-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR