產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7347 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Vibrio choleraeO139
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
SGC-7901 人細(xì)胞R-聯(lián)萘酚1酸酯質(zhì)量規(guī)格:>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤質(zhì)量規(guī)格:>97%,原裝進(jìn)口2,6-Dichloropurine
mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞2,4-二氯喹唑啉質(zhì)量規(guī)格:>98%2,4-Dichloroquinazoline
人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氯甲基蒽質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)口原裝9-(Chloromethyl)anthracene
人纖維細(xì)胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1-Bromoanthracene
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Valacyclovir HCl
人表皮色素細(xì)胞-淺色素總RNAHEM-l NA維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRVecuronium Bromide
RT4細(xì)胞,細(xì)胞 人胚肺細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞 原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml維庫溴銨(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Vecuronium Bromide
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4GDPNa2;5’-二1酸鳥苷二鈉質(zhì)量規(guī)格:>90%,BRGDP Di Salt
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) SU11274質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑SU-11274
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 油醇,英文名或英文縮寫:Terpineol,級別:AR,99%,規(guī)格:500克
小鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7
P9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS化四甲基,英文名或英文縮寫:Tetrametxylammonium iodide,級別:AR,98%,規(guī)格:1克
白細(xì)胞介素-12超家族β-酸乙酯鹽酸鹽10克RT
SW 1353(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠細(xì)胞)pxenmetxosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標(biāo)簽)1,5-二溴蒽(>97.0%(GC))1,5-Dibromoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))1,8-Diiodoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
獼猴肺細(xì)胞;MML29-酮基利培酮9-Keto Risperidone質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人氣管平滑肌細(xì)胞 (HTSMC)( 5×105 )6-去氟-6-羥基利培酮6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CL-0260BC-021(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×27-羥基利培酮7-Hydroxy Risperidone質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口