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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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SK-MEL-5細(xì)胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:E0352
  • 價(jià)格: ¥1770/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-06
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E0352
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 皮膚黑色素瘤;腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移
細(xì)胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁
物種來源
包裝規(guī)格 1×106
純度 詳見說明書%
是否進(jìn)口

產(chǎn)品簡稱:SK-MEL-5細(xì)胞
中文名稱:人皮膚細(xì)胞

規(guī)格:1×106

種屬:人

來源:皮膚;腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

培養(yǎng)基:DMEM

狀態(tài):貼壁

單位:T25/

貨號:E0352

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

SK-MEL-5細(xì)胞

1×106

E0352

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.
細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:21:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:31:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80冰箱內(nèi)過夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:

小鼠病毒表面抗體   英文名稱:   Mouse Hepatitis B surface Aibody   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   HBsAb  Ethyl β-D-apiofuranoside  1932405-61-2  中文名:  分子式:C7H14O5 

小鼠表面抗原elisa試劑盒   小鼠表面抗原試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠表面抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠表面抗原試劑盒、小鼠表面抗原elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  N4-Benzoylcytosine  中文名:N4-苯甲?;奏?/span>  分子式:C11H9N3O2  度:98.0%

小鼠表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒     N4-Benzoylcytidine  中文名:N4-苯甲酰胞苷  分子式:C16H17N3O6  度:98.0%

小鼠表面抗體(HBsAb)ELISAKit     N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine  4836-13-9  中文名:N4-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷  分子式:C16H17N3O5  度:98.0%   

小鼠e抗原elisa試劑盒   小鼠e抗原試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠e抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠e抗原試劑盒、小鼠e抗原elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  N4-Benzoylcytosine  中文名:N4-苯甲?;奏?/span>  分子式:C11H9N3O2
銀椴苷 HPLC98% 20mg 小鼠樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒 ,英文名: INSL3 ELISA Kit

銀杏酚酸 HPLC98% 20mg 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測試劑盒rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 96T/48T

銀杏內(nèi)酯A HPLC98% 20mg 犬催乳素(PRL/LTH)試劑盒 Canine Prolactin/Leoopic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit

銀杏內(nèi)酯B HPLC98% 20mg 英文名稱HumanDPDELISAKit人脫氧吩(DPD)規(guī)格:96T/48T

銀杏內(nèi)酯C HPLC98% 20mg 大量真菌/酵母細(xì)胞基因組DNA化試劑盒10

銀杏內(nèi)酯J HPLC98% 20mg Ratisletcellaibody,ICAELISA試劑盒大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

銀杏雙黃酮 HPLC98% 10mg 小鼠受體底物2(IRS2)ELISA試劑盒 ,英文名: IRS2 ELISA Kit

吲哚醇 HPLC98% 20mg 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 96T/48T

隱丹參酮 HPLC98% 20mg 犬促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒 Canine adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit

隱綠原酸 HPLC98% 20mg 英文名稱HumanDHEA-S-7ELISAKit人脫氫表雄同-S-7(DHEA-S-7)規(guī)格:96T/48T
人細(xì)胞;A549 [A-549] 人腦成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-O-去甲基奧美拉唑硫化物5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA奧美拉唑 Omeprazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP33,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105)奧美拉唑 (標(biāo)準(zhǔn)品)Omeprazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠肝細(xì)胞;IAR20氯唑沙宗Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯唑沙宗(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlorzoxazone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SK-MEL-5
細(xì)胞人星形膠質(zhì)細(xì)胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)質(zhì)量規(guī)格:100mg/L,基體:1%HCIVanadium standard

CM-H073人膀胱成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mlYtterbium standard

TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Decitabine

人真皮成纖維母細(xì)胞-新生HDF-n地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Decitabine

RWPE-1細(xì)胞,人正常上皮細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,SH3細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細(xì)胞)FM-25-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分sigma貨號A3656 5-Aza-2-deoxycytidine
注意事項(xiàng):
SK-MEL-5細(xì)胞1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小;
5)嚴(yán)格的無菌操作;
6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 


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