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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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NCI-H3255 細胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:E0473
  • 價格: ¥1940/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-07
  • 更新日期: 2025-01-09
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E0473
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 肺癌;女性
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁
物種來源
包裝規(guī)格 1×106
純度 詳見說明書%
是否進口

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

NCI-H3255   細胞

1×106

E0473

產(chǎn)品簡稱:NCI-H3255 細胞
中文名稱:人細胞

規(guī)格:1×106

種屬:人

來源:;女性

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):貼壁

單位:T25/

貨號:E0473

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.
細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:21:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:31:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80冰箱內(nèi)過夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。 
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。

注意事項:
NCI-H3255 細胞1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
4)點燃酒精燈:注意火焰不能太小;
5)嚴格的無菌操作;
6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:

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表可木酸 HPLC98% 5mg MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit小鼠e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

羥基漢黃芩素 HPLC98% 5mg 小鼠線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)ELISA試劑盒 ,英文名: TFAM ELISA Kit

羥基肉桂酸甲酯 HPLC98% 5mg 兔兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒Rabbitcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T

羥基三尖杉堿 HPLC98% 5mg 牛孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 Bovine progesterone,PROG ELISA Kit

,二羥基,,,四甲氧基黃酮 HPLC98% 5mg 英文名稱HumanEndotheliallipaseELISAKit人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

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人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CM-R080大鼠大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸丙美卡因Proparacaine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-芐氧羰基-L-絲氨酸Z-Ser-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
NCI-H3255
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RK3 Others Human kC / RK3 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-天冬氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-Aspartic acid

CL-0264C918(人眼脈絡(luò)色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2DL-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Glutamine

HA Others H4N8 甲型 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-beta-苯丙氨酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-beta-Phenylalanine

小鼠上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-肉堿鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Carnitine hydrochloride


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