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帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應器了。

產(chǎn)品簡稱：LN299細胞
中文名稱：人細胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01009

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。

注意事項：
LN299細胞（1）預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。

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兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene  20734-58-1  中文名：1,8-雙二甲氨基萘  分子式：C14H18N2  度：98.0%   

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兔子凝血酶受體()ELISA試劑盒              9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2 

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鈣鎂試劑  Calmagite  質(zhì)量規(guī)格：IND 英文名稱HumanSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit人5-羥色氨(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鎘試劑  Cadion  質(zhì)量規(guī)格：AR 糞便副傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20

銅鐵試劑  Cupferron  質(zhì)量規(guī)格：AR ELISAKitTSA人特異性抗原規(guī)格：48T/96T

二苯偶氮碳(AR)  Diphenylcarbazone  質(zhì)量規(guī)格：AR 小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

二苯偶氮碳(>60%(HPLC))  Diphenylcarbazone  質(zhì)量規(guī)格：>60%(HPLC) 人中性粒細胞堿性0酸酶(NAP)ELISA檢測試劑盒Humanneuophilicalkalinephosphatase,NAPELISAKit 96T/48T

二甲基黃  Dimethyl yellow  質(zhì)量規(guī)格：IND 大鼠樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit

砷試劑,DDTC銀鹽  Diethyl dithio carbamic acid silver salt  質(zhì)量規(guī)格：AR 英文名稱Human25(OH)D3ELISAKit人25羥維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,6-二酚靛酚鈉  2,6-Dibromophenolindophenol Na salt  質(zhì)量規(guī)格：AR 糞便副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增檢測試劑盒20
人肺大內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL維生素B1Vitamin B1質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP

SK-MEL-1細胞，人皮膚色素瘤細胞 德氏乳桿菌乳酸亞種 人十二脂腸腺癌;HuTu-80維生素B12(標準品)vitamin B12質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (Fc 標簽)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))10-Undecyn-1-ol質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

KG-1(人) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞甲基二水楊酸(異構(gòu)體的混合物)(>90.0%(T))Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B2-氨基-2',5-二氯二苯甲酮(>98.0%(N))2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)
LN299細胞KLK1 Others Human 人 KLK-1 / Kallikrein-1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-阿拉伯糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-(-)-Arabinose

CM-H044人肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLD-阿拉伯糖(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品D-arabinose

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸組氨瑞林 質(zhì)量規(guī)格：BR,度>98%Histrelin Acetate

小鼠牙細胞完全培養(yǎng)基 100mL青霉素V鉀質(zhì)量規(guī)格：1440~1680 U/mg,BRPenicillin V potassium salt

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