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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：NCM356細(xì)胞
中文名稱：人上皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：；上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01409

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit     6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名：6-芐氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit                 6-Benzyloxyindole  中文名：6-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒     6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3  度：98.0%
優(yōu)級(jí)真空泵油(Viscosity Grade 100)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 100 人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 96T/48T

優(yōu)級(jí)真空泵油(Viscosity Grade 150)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 150 大鼠牙本質(zhì)0蛋白(DPP)試劑盒 Rat dein phosphoproteins,DPP ELISA kit

紫尿酸 一水合物(97%)  Violuric acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.97 英文名稱RatHLA-1ELISAKit大鼠組織相容性抗原(HLA-1)規(guī)格：96T/48T

生育酚乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Vitamin E acetate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣調(diào)蛋白結(jié)合檢測(cè)試劑盒篩選5

烯效唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%)  Uniconazole  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5% ELISAKitLPL人脂蛋白脂酶規(guī)格：48T/96T

2-羥基-5-硝基煙酸(98%)  2-Hydroxy-5-nitronicotinic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98 小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 ，英文名： PI3K ELISA Kit

三十六烷(standard for GC,≥98.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC) 大鼠催乳素(PRL)ELISA檢測(cè)試劑盒ratprolactin,PRLELISAKit 96T/48T

三十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 人凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)試劑盒 Human apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1 ELISA Kit

正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC) RatNein-1,n1ELISAKit大鼠軸突生長(zhǎng)誘向因子1(n1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

正十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) EB病毒介導(dǎo)永生化細(xì)胞克隆試劑盒10
視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)卡維地洛-甲基-d3Carvedilol-methyl-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Jurkat77細(xì)胞，人T瘤細(xì)胞Jurkat亞系 615小鼠株,Ca761細(xì)胞 牛腦垂體提取物BPE卡維地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

NCI-H358(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 綠色熒光蛋白標(biāo)記人細(xì)胞;MGC803-GFP(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)
NCM356細(xì)胞IL1A Protein Human 重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-N-beta-Trityl-L-asparagine

PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2 Lec1(卵巢細(xì)胞)N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OH

CL-0244WISH(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Boc-L-天冬氨酸 4-芐酯 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-L-Asp(OBzl)-OH

SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-L-Asp(OcHex)OH

人骨骼肌細(xì)胞cDNAHSkMC cDNABOC-β-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRBoc-?-Ala-OH
注意事項(xiàng)：
NCM356細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。