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產(chǎn)品簡稱：OVCAR5細胞
中文名稱：人細胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：；腹水轉(zhuǎn)移；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01470

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。
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彈性蛋白酶  Elastase, pancreatic from porcine pancreas  質(zhì)量規(guī)格：30 units/mg RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂肪酶  Lipase  質(zhì)量規(guī)格：20000U/g,BR GST融合蛋白因子10α(FACTORXa)酶切試劑盒10

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透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬)  Hyaluronic Acid    質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:80萬-150萬 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒 ，英文名： ACP5b ELISA Kit

透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量3K）  Hyaluronic Acid    質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA檢測試劑盒RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 96T/48T

透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量10K）  Hyaluronic Acid    質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:10000 人單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)試劑盒 Human LIMK1 ELISA Kit

透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量90K）  Hyaluronic Acid    質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:90000 RatprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸（分子量4K）  Hyaluronic Acid    質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:4000 H4-K4基100微克
肺大動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3,4-苯并芘(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品3,4-Benzopyrene

LNCaP clone FGC細胞，細胞 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞,AN3 CA細胞 人平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA1,3-丁二醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 (±)-1,3-Butanediol

EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細胞;B95-8乙酸銨(分子生物學(xué)級)質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級Ammonium acetate

GZMB Others Human 人 Granzyme B / GZMB 人細胞裂解液 (陽性對照) 微晶纖維素(100 um)質(zhì)量規(guī)格：BR,100 umCellulose, Microcrystalline

大鼠腦膜細胞RMC乳糖；α-乳糖,一水質(zhì)量規(guī)格：BRalpha-Lactose, monohydrate
OVCAR5細胞HGC-27人細胞細胞激活五肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRLymphocyte Activating Pentapeptide

RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 正常人細胞，Hs 1.Tes細胞 MDBK (NBL-1)(牛腎細胞)蜂質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRMelittin(Mellitin)

人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205Metamorphosin A質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRMetamorphosin A

5E Others Mouse 小鼠 5E / CD73 人細胞裂解液 (陽性對照) 新京都肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRNeo-Kyotorphin

小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3黃芩苷(標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Baicalin
注意事項：
OVCAR5細胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。