產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E01502 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 結(jié)腸腺癌;腹水轉(zhuǎn)移;男性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:COLO-201細胞
中文名稱:人細胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:腺癌;腹水轉(zhuǎn)移;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):半貼壁
單位:
貨號:E01502
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
COLO-201細胞 | 瓶 | E01502 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
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十八烷(標(biāo)準品) Octadecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC) 小鼠0脂酰絲酸(PS)ELISA試劑盒 ,英文名: PS ELISA Kit
2-辛酮(標(biāo)準品) 2-Octanone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC) 大鼠降鈣素(CT)ELISA檢測試劑盒RatCalcitonin,CTELISAKit 96T/48T
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菲(標(biāo)準品) Phenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,用于環(huán)境分析 Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芘(標(biāo)準品) Pyrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品 DOPAC高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20
(-)-鹽酸東莨菪堿(標(biāo)準品) (?)-Scopolamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,99.0% mouseprolactin,PRLELISA試劑盒小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十四烷(標(biāo)準品) Tetradecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,≥99.5%(GC) 小鼠0脂酰肌醇特異性0酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA試劑盒 ,英文名: PLCβ1 ELISA Kit
非洲綠猴腎細胞;VERO E6α-促激素α-MSH質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉樣蛋白(1-42),人β-Amyloid Peptide (1-42), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HOS [Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34)酰胺 (牛)[Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
NCI-H460 [H460]人大細胞細胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素[Phe2,Orn8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽)[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素[Ser4,Ile8]-Oxytocin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
COLO-201細胞IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽)天狼猩紅質(zhì)量規(guī)格:BSDirect red 80
人周邊細胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標(biāo)記) MouseDL-苯甘氨酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDL-alpha-Phenylglycine
CM-H081人主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL丁草胺標(biāo)準溶液(0.100mg/ml)質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/mlButachlor solution
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 丁草胺(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,95%Butachlor
人成纖維細胞HLF丁草胺標(biāo)準溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%Butachlor solution
注意事項:
COLO-201細胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。