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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：HLEC(Lymph)細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：淋巴；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0642

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠(chǎng)等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀(guān)察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品：

兔固（ALD）ELISA試劑盒     5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  關(guān)鍵詞：  紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  關(guān)鍵詞：  千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2
內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸(>98.0%(T))  meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 英文名稱(chēng)RatAdiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格：96T/48T

吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[藥物研究配體]  Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt  質(zhì)量規(guī)格：藥物研究配體 肝脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[藥物研究配體]  Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt  質(zhì)量規(guī)格：藥物研究配體 ELISAKitFFA人游離脂肪酸規(guī)格：48T/96T

1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N))  1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N) 小鼠顆粒酶M(GZMM)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMM ELISA Kit

己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Adipate  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 96T/48T

3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))  3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 大鼠調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit

雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))  Bis(phenylacetyl) Disulfide  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 英文名稱(chēng)RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

苯并紅紫4B[pH指示劑]  Benzopurpurine 4B  質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑 高多糖/酚植物線(xiàn)粒體DNA萃取試劑盒10/20

五甲氧基紅(>98.0%(HPLC))  Pentamethoxy Red  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) ELISAKitFEP人游離原卟啉規(guī)格：48T/96T

苯甲基橙(>95.0%(W))  Benzyl Orange  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(W) 小鼠顆粒酶K(GZMK)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMK ELISA Kit
97H-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 97H-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL，溶劑：水)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL，溶劑：水 dodecylbenzenesulfonate solution

GDF10 Protein Mouse 重組小鼠 BMP-3b / GDF-10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)磺胺甲二唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethizole

人上皮細(xì)胞(HPEpiC)(5×105) 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human抑肽酶(來(lái)源于牛肺,胰蛋白酶抑制劑)質(zhì)量規(guī)格：≥3TIU/mg,進(jìn)分,來(lái)源: 牛肺或牛胰Aprotinin

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]E-64,蛋白酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRE64

CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿齊沙坦酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAzilsartan Medoxomil
HLEC(Lymph)細(xì)胞hPC-PL-c 人類(lèi)胎盤(pán)周細(xì)胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xì)胞MMa巴洛沙星質(zhì)量規(guī)格：度> 98.5%,BR,二水合物Balofloxacin Dihydrate

CL-0454TE-11(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸苯達(dá)莫司汀質(zhì)量規(guī)格：度> 98%Bendamustine HCl

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸苯達(dá)莫司?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Bendamustine HCl

人膀胱平滑肌細(xì)胞RNAHBdSMC miRNA5 μg澳洲茄邊堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Solamargine

兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTF 細(xì)胞，Hep 3B2.1-7細(xì)胞 IR983F細(xì)胞，大鼠細(xì)胞澳洲茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥94.50%,標(biāo)準(zhǔn)品Solasonine
注意事項(xiàng)：
HLEC(Lymph)細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。