產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0355 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 膀胱癌;女性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:EJ138細胞
中文名稱:人細胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E0355
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
EJ138細胞 | 瓶 | E0355 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO
人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit 3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3
人特異性抗原(PSA)ELISAKit 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN
人葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISAKit Tiamulin 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S
人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 知母; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
白鮮堿(標準品) Dictamnine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 RatC-PeptideELISA試劑盒大鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羅替戈汀 Rotigotine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠激活蛋白C(APC)ELISA試劑盒 ,英文名: APC ELISA Kit
鹽酸羅替戈汀 Rotigotine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 人硫酸皮膚素(DS)ELISA檢測試劑盒Humandermatansulfate,DSELISAKit 96T/48T
右雷佐生鹽酸鹽;右丙亞胺鹽酸鹽 Dexrazoxane HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠腺病毒(ADV)抗體(IgG)試劑盒 Rat adenovirus(ADV)aibody IgG ELISA kit
SGI-1776 SGI-1776;SGI1776 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Pim1抑制劑 英文名稱Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)規(guī)格:96T/48T
JNJ-26854165 (Serdemetan) JNJ 26854165 質(zhì)量規(guī)格:>98% 果菜D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20
SB505124 SB-505124 質(zhì)量規(guī)格:>98% ELISAKitIAPP人胰島淀粉樣多肽規(guī)格:48T/96T
NLG919 NLG-919 質(zhì)量規(guī)格:>98%,IDO抑制劑 小鼠激活T-細胞核因子1(NFATC1)ELISA試劑盒 ,英文名: NFATC1 ELISA Kit
維莫德吉(GDC0449) Vismodegib;GDC-0449 質(zhì)量規(guī)格:>98%,hedgehog抑制劑 人硫酸軟骨素(CS)ELISA檢測試劑盒Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 96T/48T
Zosuquidar;LY335979 LY-335979 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠?;囸I素(AG)試劑盒 Rat Acylated Ghrelin,AG ELISA Kit
CD22 Others Human 人 Siglec-2 / CD22 (aa 176-687) 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸氯己定質(zhì)量規(guī)格:>98%Chlorhexidine Acatate
人急性早幼粒細胞;HL-60氟伐他汀鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRFluvastatin salt
293ET細胞,表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞 非洲綠猴腎細胞,CV-1細胞 CL-0294MuM-2C(人眼脈絡色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2西洛他唑(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Cilostazol
A-427(人細胞) 5×106cells/瓶×2順鉑(進分)質(zhì)量規(guī)格:進分Sigma P4394 Cisplatin
HUtSMC-c 人類細胞(HUtSMC) 500,000cells 原代心肌細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml順鉑質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,細胞培養(yǎng)級,BRCisplatin
EJ138細胞F9(小鼠) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR雙環(huán)醇(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Bicyclol
615小鼠樹突狀細胞瘤株;DCS鹽酸貝尼地平(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Benidipine Hydrochloride
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲異靛(標準品)質(zhì)量規(guī)格:供UV法含量測定用Meisoindigo
CM-M033小鼠肝實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸丁螺環(huán)酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Buspirone Hydrochloride
WM451, 人色素瘤細胞 導管瘤細胞,BT474細胞 VERO(非洲綠猴腎細胞)鹽酸苯海拉明-d6質(zhì)量規(guī)格:美國進口Diphenhydramine-d6 Hydrochloride
注意事項:
EJ138細胞(1)預熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。