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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：293T/17細(xì)胞
中文名稱：人胚腎細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：胚腎；5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0031

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3 

內(nèi)皮素受體A   英文名稱：   Human Endothelin Receptor A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EA  2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名：  分子式：C46H72O17 

內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxandrolone  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3 

腺來源的內(nèi)皮生長因子   英文名稱：   endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EG-VEGF  β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b )   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氫龍  分子式：C19H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
井岡霉素  Validamycin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA檢測(cè)試劑盒Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 96T/48T

腐草霉素  Phleomycin  質(zhì)量規(guī)格：≥97%,進(jìn)分 大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)試劑盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit

寡霉素  Oligomycin, from Streptomyces  質(zhì)量規(guī)格：>92%,進(jìn)分 英文名稱RatSHBGELISAKit大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格：96T/48T

紡錘菌素  Netropsin dihydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,進(jìn)分 果類果膠化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

頭孢菌素C鋅鹽  Cephalosporin C zinc salt  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 ELISAKitPF-3人血小板因子3規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞松弛素B  Cytochalasin B  質(zhì)量規(guī)格：>96%,進(jìn)分 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-1 ELISA Kit

煙曲霉素  Fumagillin from Aspergillus fumigatus  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分 大鼠抗凝血酶受體(A)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratai-thrombieceptor,AELISAKit 96T/48T

寡霉素B  Oligomycin B from Streptomyces  質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分 人層粘連蛋白-5(LN-5)試劑盒 Human Laminin-5,LN-5 ELISA Kit

棒曲霉素  Patulin from Penicillium expansum  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)口 Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-二苯甲酮   3-Bromobenzophenone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,原裝進(jìn)口 LoTE分子生物級(jí)溶液500毫升
CL-0107HGC-27(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氯霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Chloramphenicol

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯霉素(植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))質(zhì)量規(guī)格：>99%,用于植物細(xì)胞培養(yǎng)Chloramphenicol

K562/Adr 人阿霉素耐藥株酮舍林1酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ketanserin Tartrate

IL10 Others Human 人 IL10 / Ierleukin-10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 酮康唑質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRKetoconazole

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2酮康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Ketoconazole
293T/17細(xì)胞EC109，人細(xì)胞 順鉑耐藥株，SKOV-3/DDP細(xì)胞 SW1353(細(xì)胞)五味子酯甲(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Schisantherin A

人非小細(xì)胞;NCI-H2087西貝母堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Sipeimine

CXCL16 Others Mouse 小鼠 CXCL16 / SRPSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 西紅花苷，α-藏花素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Crocin

豬胚胎傳代細(xì)胞;ST西紅花苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品Crocin I

SELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 吳茱萸堿質(zhì)量規(guī)格：≥98%(T)，BREvodiamine
注意事項(xiàng)：
293T/17細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。