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產(chǎn)品簡稱：SK-MEL-1細(xì)胞
中文名稱：人皮膚細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：皮膚；胸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01413

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Stigmasta-4,25-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O 

高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(-PCR法)   48T  Stigmasta-4,25-dien-3-one  848669-08-9  中文名：  分子式：C29H46O  度：%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

高遷移率族蛋白 (HMGB1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Norfloxacin  70458-96-7  中文名：諾氟沙星  分子式：C16H18FN3O3 

高度質(zhì)粒中量提取試劑盒   High purity plasmid exact Kit                 Torososide A  165689-32-7  中文名：  分子式：C38H32O15 

高度質(zhì)粒小量提取試劑盒   High purity Plasmid Exaction Kit  Torososide A  中文名：  分子式：C38H32O15
2-咪唑并[1,2-a]吡嗪  6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine  質(zhì)量規(guī)格：>98% ELISAKitST人血清素/血清胺規(guī)格：48T/96T

1,2-  1,2-Propanediol  質(zhì)量規(guī)格：AR,分析 小鼠環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)ELISA試劑盒 ，英文名： EPHX4 ELISA Kit

TBB(4,5,6,7-四-1H-苯并三唑)  TBBT;NSC 231634  質(zhì)量規(guī)格：>98%,蛋白激酶抑制劑 人基膜聚糖(lumican)ELISA檢測試劑盒HumanlumicanELISAKit 96T/48T

3-羥基黃酮  3-Hydroxyflavone;Flavonol  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 大鼠維生素E(VE)試劑盒 Rat Vitamin E ELISA Kit

銀杏酸C17:1  Ginkgolic Acid C17:1  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，美國進(jìn)口 英文名稱RatCyclinD1ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D1(CyclinD1)規(guī)格：96T/48T

銀杏酸C15:1  Ginkgolic Acid C15:1  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥80%，美國進(jìn)口 核酸氧化8-氧鳥苷(8-oxo-G)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20

銀杏酸C13:0，白果酸C13:0  Ginkgolic Acid C13:0  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitSAP人血清淀粉樣蛋白P規(guī)格：48T/96T

AZD9291  AZD-9291(free base)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,EGFR抑制劑 小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

AZD9291 Mesylate  AZD-9291 mesylate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,EGFR抑制劑 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測試劑盒Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T

乳酸鏈球菌素;乳鏈菌肽;尼生素  Nisin  質(zhì)量規(guī)格：BR,效價(jià)>900IU/MG 人補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 Human Compleme 4,C4 ELISA Kit
Ca Ski(人上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2孔雀石綠質(zhì)量規(guī)格：BSMalachite green

FCAR Others Human 人 FCAR / CD89 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 燦爛綠,亮綠質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant green

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1酸洗石棉質(zhì)量規(guī)格：ARAsbestos acid washed

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苊（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Acenaphthene

Lewis瘤 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3Aluminum solution
SK-MEL-1細(xì)胞CPA2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 塞克硝唑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Secnidazole

小鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紅杉醇,西曲依醇 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%Sequoyitol

97H人細(xì)胞 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS焦1酸鈣(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRCalcium pyrophosphate

IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Ierleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽)加拿大香脂質(zhì)量規(guī)格：商品級Canada balsam

TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人細(xì)胞)己內(nèi)酰胺(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRCaprolactam
注意事項(xiàng)：
SK-MEL-1細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。