產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E01145 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 皮膚鱗癌;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:HSC-5細(xì)胞
中文名稱:人皮膚鱗癌細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:皮膚鱗癌;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號(hào):E01145
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
HSC-5細(xì)胞 | 瓶 | E01145 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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二氧化快速測(cè)試盒 dioxide rapid test case α-Spinasterol glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6
二氫二醇脫氫酶 英文名稱: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DDH2 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 145163-97-9 中文名: 分子式:C29H48O2
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二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0%
尿苷-5'-二葡萄糖鈉鹽(UDPG) Uridine-5-diphosphoglucose di salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Sigma Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-鳥苷一二鈉鹽(GMP) GMP 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒 ,英文名: TWEAK ELISA Kit
腺苷-5單(進(jìn)口原裝) AMP 質(zhì)量規(guī)格:>99,ALFA原裝 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFollistatin,FSELISAKit 96T/48T
腺苷-5單(AMP) Adenosine-5-monophosphoric acid 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒 Human ai-Sa-aibody ELISA Kit
5'-尿嘧啶 5-Bromouracil 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尿嘧啶 Uracil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 載玻片細(xì)胞NFKAPPABP65蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
胞嘧啶 Cytosine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISA試劑盒羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胞嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Cytosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 ,英文名: AIL-R4 ELISA Kit
硫酸腺嘌呤 Adenine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T
硫酸腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品) Adenine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒 Human ai-Mi2-aibody ELISA Kit
VTN Protein Mouse 重組小鼠 Vionectin / VTN 蛋白 (His 標(biāo)簽)三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(>98%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98%(T)Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III)
人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(>95%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95%(T)Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)
THP-1人單核細(xì)胞四丁基化銨(離子對(duì)色譜級(jí))質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜級(jí)Tetrabutylammonium iodide
HGF Others Cynomolgus 食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三辛胺(離子對(duì)試劑)質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑Trioctylamine
人羊膜細(xì)胞;WISH草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M)質(zhì)量規(guī)格:0.05M oxalate solution
HSC-5細(xì)胞CNKSR3 Others Human 人 MAGI1 / CNKSR3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Minoxidil
人肝細(xì)胞總RNAHH NA米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶質(zhì)量規(guī)格:>99.0%Minoxidil Sulfate
大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3 B細(xì)胞,WEHI 22.1細(xì)胞 M5076細(xì)胞,小鼠網(wǎng)織細(xì)胞米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Minoxidil Sulfate
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2L-組氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Histidine
HA Others H11N2 甲型 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Alanine
注意事項(xiàng):
HSC-5細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小;
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。