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產(chǎn)品簡稱：HUVSMC細(xì)胞
中文名稱：人臍平滑肌細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：臍平滑肌

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0687

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實驗提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒（測血清、組織）（紫外比色法）  Avanafil  330784-47-9  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3 

蛋白質(zhì)羰基測試盒   紫外分光光度法   50管/24樣              Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（總蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)  Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/mlBSA)   1ml  3-Amino-2-naphthoic acid  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%

膽堿酯酶（CHE）測定試劑盒（比色法）                    Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4
(+)-兒茶素水合物  (+)-Catechin hydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分 MonkeyIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(+)-兒茶素水合物（標(biāo)準(zhǔn)品）  (+)-Catechin hydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit

(+)-兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）  (+)-Catechin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA檢測試劑盒MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 96T/48T

維生素B6,鹽酸吡哆醇  Vitamin B6 Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人抗DNA酶B抗體(ai-DNase B Ab)試劑盒 Human ai-deoxyribonuclease B aibody(ai-DNase B Ab)ELISA Kit

維生素B6（標(biāo)準(zhǔn)品）  vitamin B6  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 Ratacetylcholine,ACHELISAKit大鼠乙酰膽堿(Ach)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

非達(dá)霉素  Fidaxomicin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 載玻片細(xì)胞PDGF-B蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿  (+)-Bicuculline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR MonkeyIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  (+)-Bicuculline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit

石杉堿甲  (?)-Huperzine A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 96T/48T

表沒食子兒茶素  EGC   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR 人抗E3泛素蛋白連接酶IM21(IM21)抗體試劑盒 Human ai E3 ubiquitin-protein ligase IM21(IM21)aibody ELISA kit
H22(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Magnolol

HWP visceral Pellet 人類內(nèi)臟白前脂肪細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NA埃索美拉唑鎂(三水)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BREsomeprazole magnesium trihydrate

T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL雙(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dichlorophene

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異丙凈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dipropetryn

成纖維細(xì)胞生長添加物(不含動物成分)FGS-acf異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%[3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution
HUVSMC細(xì)胞CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL兩性霉素B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Amphotericin B

NP Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸增素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAngiotensin Acetate

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞-處理MEF-mt鎂試劑II質(zhì)量規(guī)格：ARMagnesonII

非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6 人類惡性色素瘤，A375細(xì)胞 LS 174T(腺癌細(xì)胞)高鐵試劑質(zhì)量規(guī)格：AR,98.5%Ferron

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922酚試劑(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽)質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%3-Methyl-2-benzothialinone
注意事項：
HUVSMC細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。